ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | TE豚鼠端粒酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | guinea pig telomerase, TE Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-g64723 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
鉀離子通道蛋白家族KCNQ1抗體英文全稱tissue transglutaminase IgG antibody英文簡(jiǎn)稱tTG-IgG檢測(cè)范圍5844nmol/L-200ng/mL
220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體英文全稱cytokine-induced neutrophil chemoattractant-3英文簡(jiǎn)稱CINC-3檢測(cè)范圍5845nmol/L-1000pg/mL
磷酸化220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體英文全稱metabotropic glutamate receptor 5英文簡(jiǎn)稱mGluR5檢測(cè)范圍5846nmol/L-20ng/mL
驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員15抗體英文全稱glial glutamate transporter 1英文簡(jiǎn)稱GLT-1檢測(cè)范圍5847nmol/L-4000pg/mL
Kelch樣蛋白22抗體英文全稱C1q And Tumor Necrosis Factor Related Protein 15英文簡(jiǎn)稱CTRP15檢測(cè)范圍5848nmol/L-10ng/mL
著絲點(diǎn)關(guān)聯(lián)蛋白1抗體英文全稱remnant lipoprotein cholesterol英文簡(jiǎn)稱RLP-c檢測(cè)范圍5849nmol/L-800umol/L
驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員C1抗體英文全稱Purinergic Receptor P2X, Ligand Gated Ion Channel 3英文簡(jiǎn)稱P2RX3檢測(cè)范圍5850nmol/L-10ng/mL
kelch樣蛋白5抗體英文全稱Anti-thyroid antibodies英文簡(jiǎn)稱ATAB檢測(cè)范圍5851nmol/L-160ng/mL
有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白樣2抗體英文全稱78 kDa glucose-regulated protein英文簡(jiǎn)稱HSPA5檢測(cè)范圍5852nmol/L-50ng/mL
有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白樣2B抗體英文全稱cardiac myosin antibody英文簡(jiǎn)稱CM-Ab檢測(cè)范圍5853nmol/L-160ng/mL
kelch樣蛋白9抗體英文全稱5α-reductase type 2英文簡(jiǎn)稱5αRT 2檢測(cè)范圍5854nmol/L-10ng/mL
kelch樣蛋白13抗體英文全稱5α-reductase type 1英文簡(jiǎn)稱5αRT 1檢測(cè)范圍5855nmol/L-16ng/mL
囊泡胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1家族蛋白抗體英文全稱insulin receptor tyrosine kinase substrate英文簡(jiǎn)稱IRTK檢測(cè)范圍5856nmol/L-100U/L
鞭毛蛋白2抗體英文全稱Nel-like molecule 1英文簡(jiǎn)稱NELL1檢測(cè)范圍5857nmol/L-20ng/mL
鈣激活鉀通道蛋白3抗體英文全稱apoptosis- associated speck-like protein containing CARD英文簡(jiǎn)稱ASC檢測(cè)范圍5858nmol/L-40ng/mL
腎臟和腦蛋白抗體英文全稱Glutamate Receptor, Ionotropic, AMPA 2英文簡(jiǎn)稱GRIA2檢測(cè)范圍5859nmol/L-40ng/mL
人抗腎小球底膜抗體(GBM)ELISA試劑盒SET7/SET9 (C24B1) Rabbit mAb300 ul
人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒Phospho-Bcl-2 (Ser70) (5H2) Rabbit mAb100 ul
人膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒Phospho-Bcl-2 (Ser70) (5H2) Rabbit mAb20 ul
人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒Phospho-Bcl-2 (Ser70) (5H2) Rabbit mAb100 ul
人麥角蛋白IgA(Gliadin-IgA)ELISA試劑盒MEP50 (P328) Antibody1 Kit
人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒PTMScan® Phospho-Ser/Thr-Pro Motif [p(S/T)P] Kit100 ug
人凝膠原蛋白(gelson)ELISA試劑盒CD3 (17A2) Rat mAb (PE Conjugate)100 ul
人凝溶膠蛋白(GS)ELISA試劑盒Phospho-cPLA2 (Ser505) Antibody100 ul
TE豚鼠端粒酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理人質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA Kit,48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
鼠質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA Kit,48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
大鼠質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Paenibacillus graminis
人質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Trametes ochracea
鼠質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA Kit,48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
大鼠質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Pythium myriotylum
人質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 1mg/ml×5ml
鼠質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA Kit,48T/96T 用途: 食用
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)