公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | HGH人生長(zhǎng)激素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human growth hormone, HGH Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H63673 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
Streptomyces│noursei 諾爾斯鏈霉菌Streptomyces│noursei分離基物:土壤斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no產(chǎn)生抗真菌的制霉菌素(Nystatin)12生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Kloeckera│apiculata 檸檬形克勒克酵母Kloeckera│apiculata分離基物:蜜棗凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no13生長(zhǎng)條件:25-28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Actinomadura│citrea 檸檬馬杜拉放線菌Actinomadura│citrea凍干物安全等級(jí):1模式菌株:CM0027生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥 純度:>97.0%(GC)
Streptomyces│citreus 檸檬鏈霉菌Streptomyces│citreus凍干物安全等級(jí):1模式菌株:noCM0038生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:>97.0%(GC)
Nocardiopsis│sp. 擬諾卡氏菌屬菌種Nocardiopsis│sp.分離基物:土壤凍干物安全等級(jí):1模式菌株:nom3抑制劑;抗真菌;作用于PaSecA、EcSecACM0027生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥 純度:>97.0%(GC)
Streptomyces│naraensis 奈良鏈霉菌Streptomyces│naraensis斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no產(chǎn)生ActidioneCM0012生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:98%
Naxibacr│sp. 納西桿菌屬菌種Naxibacr│sp.分離基物:土壤凍干物安全等級(jí):1模式菌株:noCM0027生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:98%
Actinomadura│namibiensis 納米比亞馬杜拉放線菌Actinomadura│namibiensis凍干物安全等級(jí):1模式菌株:CM0027生長(zhǎng)條件:26C存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥 純度:98+%
HGH人生長(zhǎng)激素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理NEDD4L/NEDD4-2 泛素連接酶NEDD4-2抗體萊苞迪甙A氧化亞錫Human GRα (Glucocorticoid Receptor Alpha) ELISA Kit
Phospho-NEDD4L (Ser342) 磷化泛素連接酶NEDD4-2抗體黃芩苷1H,1H,2H-全-1-癸烯Human GRβ (Glucocorticoid Receptor Beta) ELISA Kit
NCoR2 核受體輔助抑制因子2抗體野黃芩苷1H,1H,2H-全-1-癸烯Human GSK3β (Glycogen Synthase Kinase 3 Beta) ELISA Kit
NEP/MME 金屬肽鏈內(nèi)切酶抗體黃芩素1H,1H,2H-全-1-癸烯Human GSK3α (Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha) ELISA Kit
NDRG1/Cap43 分化相關(guān)基因NDRG1抗體秦皮素順式-2,6-二甲基Human A-GHRL (Acylated Ghrelin) ELISA Kit
Phospho-NDRG1 (Ser330) 磷化分化相關(guān)基因NDRG1抗體秦皮甲素順式-2,6-二甲基Human COX (Cytochrome C Oxidase) ELISA Kit
Phospho-NDRG1 (Thr346) 磷化分化相關(guān)基因NDRG1抗體秦皮乙素2,5-二苯Human SMAF (Specific Macrophage Arming Factor) ELISA Kit
NDRG2 抑癌基因NDRG2抗體綠原2,5-二苯Human CFHR5 (Complement Factor H Related Protein 5) ELISA Kit