公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | ASCA人抗釀酒酵母抗體ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Anti-Saccharomyces cerevisiae antibody, ASCA Elisa Kit |
貨號 | FS-H64088 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
Cripto1(NT) 畸胎瘤衍生長因子抗體(N端) 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml 6Chloroimidazo[1,2b]pyridazine
CCDC85B 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白85B抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Adenine phosphate
PTOV1 前列腺腫瘤高表達蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Hypoxanthine
Cripto1 畸胎瘤衍生長因子抗體(C端) 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Guanine
Cripto 1 monoclonal (CT) 畸胎瘤衍生長因子單克隆抗體(C端) 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Guanine
Cripto 1 monoclonal 畸胎瘤衍生長因子單克隆抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Watersoluble tetrazoliuM 8;GLT008
CSFV Polyprotein 豬瘟病抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml GLT005
SMN1 運動神經(jīng)元生存蛋白1 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml GLT004
Interleukin 36β英文簡稱IL36β7號染色體開放閱讀框72抗體 檢測范圍:2110nmol/L320pg/ml
MSA3IgG antibody英文簡稱MSA3IgG卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體 檢測范圍:2111nmol/L200ng/mL
Gli英文簡稱Gli卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白43抗體 檢測范圍:2112nmol/L2000pg/mL
Epidermal growth factor Like Domain Protein, Multiple 7英文簡稱EGFL7卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白46抗體 檢測范圍:2113nmol/L30μg/ml
amyloid beta英文簡稱Aβ卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白63抗體 檢測范圍:2114nmol/L480ng/mL
Voltagedependent calcium channel subunit alpha2 delta1英文簡稱CACNA2D1卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白54抗體 檢測范圍:2115nmol/L20ng/mL
Parathyroid Hormone Receptor 1英文簡稱PTHR1卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白61抗體 檢測范圍:2116nmol/L20ng/mL
papillomavirus 16 L2 protein英文簡稱HPV16 L2 protein卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體 檢測范圍:2117nmol/L
Interferon γ antibody英文簡稱IFNγAb周期蛋白依賴性激酶CABLES1抗體 檢測范圍:2118nmol/L80ng/mL
Ceramide Kinase英文簡稱CERK分裂周期相關(guān)蛋白3抗體 檢測范圍:2119nmol/L80ng/mL
hexosaminidase英文簡稱Hex分裂周期2樣蛋白激酶5抗體 檢測范圍:2120nmol/L24ng/mL
Coenzyme A英文簡稱CoA神經(jīng)酰激酶CERK抗體 檢測范圍:2121nmol/L100U/L
Cluster of Differentiation 39英文簡稱CD39分裂周期樣激酶2抗體 檢測范圍:2122nmol/L200ng/mL
S100 Calcium Binding Protein B英文簡稱S100β分裂周期樣激酶3抗體 檢測范圍:2123nmol/L8ng/mL
phosphorylated TAR DNA binding protein 43英文簡稱pTDP43維甲調(diào)節(jié)核基質(zhì)相關(guān)蛋白抗體 檢測范圍:2124nmol/L20ng/mL
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GRM2/FITC 熒光素標記代謝型谷氨受體2IgG核DNA結(jié)合蛋白C1D抗體咪唑-2-甲乙酯Rat PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen) ELISA Kit