ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè) |
英文名稱 | gamma glutamyl transpeptidase |
貨號(hào) | FS-P64990 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢(shì)如下:
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體產(chǎn)品別名:小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),Goldenseal (Hydrastis canadensis) Rhizome Extract #1 BXL(REQUEST QUOTE)
甲胎蛋白抗體產(chǎn)品別名:小鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),Griffonia (Griffonia simplicifolia) Seed Extract #6 BXL(REQUEST QUOTE)
毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體產(chǎn)品別名:小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),Griffonia (Griffonia simplicifolia) Seed Extract #5 BXL(REQUEST QUOTE)
ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體產(chǎn)品別名:小鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),Griffonia (Griffonia simplicifolia) Seed Extract #4 BXL(REQUEST QUOTE)
肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3抗體產(chǎn)品別名:小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),Griffonia (Griffonia simplicifolia) Seed Extract #3 BXL(REQUEST QUOTE)
性鈣調(diào)蛋白3抗體產(chǎn)品別名:小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),Griffonia (Griffonia simplicifolia) Seed Extract #2 BXL(REQUEST QUOTE)
磷化CD156b抗體產(chǎn)品別名:小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),Griffonia (Griffonia simplicifolia) Seed Extract #1 BXL(REQUEST QUOTE)
乙脫氫酶5抗體產(chǎn)品別名:小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),Licorice (Glycyrrhiza glabra) Root Extract #6 BXL(REQUEST QUOTE)
乙脫氫酶6抗體產(chǎn)品別名:小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),Licorice (Glycyrrhiza glabra) Root Extract #5 BXL(REQUEST QUOTE)
溶血磷脂酰轉(zhuǎn)移酶5抗體產(chǎn)品別名:小鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),Licorice (Glycyrrhiza glabra) Root Extract #4 BXL(REQUEST QUOTE)
遺傳性失明相關(guān)蛋白AIPL1抗體產(chǎn)品別名:小鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),Licorice (Glycyrrhiza glabra) Root Extract #3 BXL(REQUEST QUOTE)
免疫調(diào)節(jié)蛋白AIRE抗體產(chǎn)品別名:小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),Licorice (Glycyrrhiza glabra) Root Extract #2 BXL(REQUEST QUOTE)
磷化蛋白激酶AKT1抗體產(chǎn)品別名:小鼠腦源性神經(jīng)生長因子(BDNF)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),Licorice (Glycyrrhiza glabra) Root Extract #1 BXL(REQUEST QUOTE)
磷化蛋白激酶AKT1抗體產(chǎn)品別名:小鼠腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),銀杏葉提取物#6 Ginkgo (Ginkgo biloba) Leaf Extract #6 BXL(REQUEST QUOTE)
磷化蛋白激酶AKT1抗體產(chǎn)品別名:小鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),銀杏葉提取物#5 Ginkgo (Ginkgo biloba) Leaf Extract #5 BXL(REQUEST QUOTE)
γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)Human C1orf31(Cytochrome c oxidase assembly factor 6 homolog) ELISA Kit球形賴氨芽孢桿菌拉丁屬名: Lysinibacillus sphaericus
Human TMPRSS15(Enteropeptidase) ELISA KitAureimonas pseudogalii拉丁屬名: Aureimonas pseudogalii
Human SPAST(Spastin) ELISA Kit大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
Human MLKL(mixed lineage kinase domain-like) ELISA Kit香菇注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human TOM20(translocase of outer mitochondrial membrane 20 homolog) ELISA Kit果生假絲酵母拉丁屬名: Candida carpophila
Human HSD3B7(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 7) ELISA Kit天藍(lán)色鏈霉菌用途: 代謝產(chǎn)物具有抗真菌活性。
Human MVK(Mevalonate kinase) ELISA Kit三葉草根瘤菌用途: 與紅三葉草共生固氮
Human CD97(CD97 antigen) ELISA Kit解幾丁質(zhì)纖維單胞菌拉丁屬名: Cellulomonas chitinilytica
Human total SOD(superoxide dismutase) ELISA Kit尖孢鐮孢拉丁屬名: Fusarium oxysporum
Human peptidoglycan(peptidoglycan) ELISA Kit多主葡萄殼菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)