樣品制備：
1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。
2）. 過濾混濁溶液。
3）. 除去樣品中的CO 2 （果糖含量測試盒說明書過過濾）。
4 ）. 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。
6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10). 含脂肪的樣品用熱水提取。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
紫外分光光度法 | 50管/48樣 | BJ-01S9569 |
商品介紹：
測定意義:
TPX屬于過氧化物酶家族，在體內(nèi)主要通過還原過氧化氫和一些氫過氧化物來實現(xiàn)抗氧化作用，功能與GPX類似，也是氧化還原循環(huán)關(guān)鍵酶之一。TPX普遍存在于各種生物體內(nèi)，酵母、植物、動物、原生動物、寄生蟲甚至細(xì)菌和古細(xì)菌體內(nèi)都含有該酶，在進化上高度保守。TPX與細(xì)胞增殖、分化、細(xì)胞凋亡及腫瘤發(fā)生調(diào)控密切相關(guān)。TPX的主要功能包括細(xì)胞脫毒、抗氧化和調(diào)節(jié)由過氧化氫介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和免疫反應(yīng)。
測定原理：
TPX催化H2O2氧化二硫蘇糖醇（DTT），H2O2的吸收波長為240nm，通過測定240nm波長處吸光度的下降速率，即可計算出TPX活性。
需自備的儀器和用品：
紫外-可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、3ml石英比色皿、雙蒸水
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用
操作流程：
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
人 TLR9 基因全長ORF克隆
人 CLCA2 基因全長ORF克隆
人 GGT6 基因全長ORF克隆
人 DCTN1 基因全長ORF克隆
人 NPBWR2 基因全長ORF克隆
人 MAB21L2 基因全長ORF克隆
人 AGMAT 基因全長ORF克隆
人 GSR 基因全長ORF克隆
人 ATG4D 基因全長ORF克隆
人 EIF3M 基因全長ORF克隆
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