ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果，可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱 | FⅢ人凝血因子ⅢELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human coagulation factor Ⅲ, FⅢ Elisa Kit |
貨號 | FS-H64192 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿，細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
左右決定因子1(LEFTY1)(學(xué)發(fā)光免疫分析法)Vitexicarpin純度：>95%
左右決定因子1(LEFTY1)(學(xué)發(fā)光免疫分析法)Ononin純度：>95%
rabbit Immunoglobulin M,IgM ELISA試劑盒 Formononetin純度：>95%
rabbit Tissuetype Plasiminogen Actilyse,tPA ELISA試劑盒Mangiferin純度：>95%
ACTH ELISA試劑盒Shikimic acid純度：>95%
Aflatoxin,AFT ELISA試劑盒Digitaline純度：>95%
AMPK ELISA試劑盒 Ilexsaponin B1純度：>95%
KAT3B/Ep300 轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體 * 0.2ml Eosinophilotactic Peptide
phosphoEp300 (Ser1834) 轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體 * 0.1ml Exendin 4
phosphoEp300 (Ser89) 轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體 * 0.1ml Fibrinopeptide B, human
KCNA5 電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員5抗體 * 0.2ml FMRFlike Neuropeptide;Schisto FLRF amide
KCNG4/KV6.3 離子通道蛋白G蛋白4抗體 * 0.2ml GRGDTP
KCNA7 電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員7抗體 * 0.1ml Galanin, porcine
KEAP1/KLHL19 胞質(zhì)接頭蛋白Keap1抗體 * 0.1ml Galanin, rat
Ketohexokinase 肝果糖激酶抗體 * 0.2ml Galanin (113)Neuropeptide Y(2536), amide (M32)
載脂蛋白A2(apo-A2)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雄(ASD)酶聯(lián)免疫試劑盒 Human Androstenedione,ASD ELISA Kit
抗BP180抗體(BP180-Ab)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： BP180-Ab ELISA Kit
RatLeukoieneC4,LT-C4酶聯(lián)免疫試劑盒白三烯C4(LTC4)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
HumangranzymesA,Gzms-A酶聯(lián)免疫試劑盒顆粒酶A(Gzms-A)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
HumanLDL-ICELISAKit低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
8異前列(8-iso-PG)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL ELISA Kit
嘌呤核苷化酶(PNP)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： PNP ELISA Kit
Rabbitlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2酶聯(lián)免疫試劑盒脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
Humanai-ophoblastaibody,ATA酶聯(lián)免疫試劑盒抗滋養(yǎng)膜抗體(ATA)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
HumancoagulationfactorⅫ，F(xiàn)ⅫELISAKit凝血因子Ⅻ(FⅫ)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
FⅢ人凝血因子ⅢELISA試劑盒實驗原理MMP-17/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-17抗體IgG趨化因子受體D6抗體鹽洗必泰Porcine FBN2 (Fibrillin 2) ELISA Kit
MMP-20/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶20抗體IgG鈣穩(wěn)態(tài)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白抗體2,4-二羰基庚乙酯Porcine CLDN14 (Claudin 14) ELISA Kit
MMP-26/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-26抗體IgGCHES1蛋白抗體2,4-二羰基庚乙酯Porcine ANGPTL4 (Angiopoietin Like Protein 4) ELISA Kit
Moesin/FITC 熒光素標(biāo)記膜突蛋白抗體IgG哺乳動物性幾丁質(zhì)酶抗體1,3-二-4,6-二Porcine BPI (Bactericidal/Permeability Increasing Protein) ELISA Kit
MOG /FITC 熒光素標(biāo)記髓鞘少樹突膠質(zhì)糖蛋白抗體IgG幾丁質(zhì)酶結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體1,3-二-4,6-二Porcine IgE (Immunoglobulin E) ELISA Kit
HSA/FITC 熒光素標(biāo)記鼠抗人血清白蛋白抗體IgG嵌合蛋白2/β2-chimaerin抗體魚腥草Porcine ECM1 (Extracellular Matrix Protein 1) ELISA Kit
HAS/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人血清白蛋白抗體IgG幾丁質(zhì)酶1抗體魚腥草Porcine MASP2 (Mannan Associated Serine Protease 2) ELISA Kit
HSA/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記鼠抗人血清白蛋白單克隆抗體IgG白抗原CD97 alpha 抗體三乙基二磷酯Porcine IL-15 (Interleukin 15) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
