試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
服務:
我們可以根據(jù)您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Hamster cathepsin K (cath-K) ELISA Kit |
貨號 | YS-H10117 |
?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
紫莖女貞苷C;Ligupurpurosi 訂購|咨詢 規(guī)格: 10mg
芝素;Sesamin 607-80-7 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
野馬追內(nèi)酯A;Eupalilide 877822-41-8 訂購|咨詢 規(guī)格: 10mg
乙酸酯;Bornyl acetate 20347-65-3 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
異土木香內(nèi)酯;Isoalantolact 470-17-7 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
遠志皂苷元;Tenuigenin 2469-34-3 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
新藤黃酸;neogambogic aci 93772-31-7 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
烏金甙; 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
脫水羊藿素;Anhydroicarit 38226-86-7 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
酚-3-O-β-D-槐糖苷;Kaem 19895-95-5 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
三葉豆紫檀苷;Trifolirhizin 6807-83-6 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
酚;Kaempferol 520-18-3 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
人參皂苷Rh1;Ginseside 63223-86-9 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷;Api 578-74-5 訂購|咨詢 規(guī)格: 10mg
10-羥基癸烯酸;10-Hydroxy- 14113-05-4 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA檢測試劑盒MSC, 小鼠雪旺細胞皺褶假絲酵母 Candida rugosa
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae微小威斯桿菌 Weissella minor
暗產(chǎn)色鏈霉菌 Streptomyces phaeochromogenesEBV-轉化人淋巴細胞
A673(人橫紋肌瘤細胞)泡盛曲霉 Aspergillus awamori
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae橘橙鏈霉菌 Streptomyces aurantiacus
盤孢菌 Gloeosporium sp.Yeast Protein Extraction Reagent/酵母蛋白抽提試劑
人肺成纖維細胞*培養(yǎng)基圓弧青霉 Penicillium cyclopium
HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞美味側耳 Pleurotus sapidus
鼠桿菌 Lactobacillus murinus豚鼠皮膚成纖維樣細胞
螢光假單胞桿菌 Pseudomonas fluorescensHK-2, 人腎皮質近曲小管上皮細胞
HA(人羊膜細胞)煙色紅曲 Monascus fuliginosus
酒假絲酵母 Candida kefyr大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarumL1210(小鼠白血病細胞)
M-NFS-60 (小鼠白血病細胞G-CSF依賴性)泡盛曲霉 Aspergillus awamori
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis異型德克酵母 Dekkera anomala
鏈孢囊菌 Streptosporangium sp.HCC827(人非小細胞肺細胞)
操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。