參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：牛傳染性胸膜肺炎PCR試劑盒
產(chǎn)品分類：熒光定量PCR
貨號(hào)：CP101180
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
坦索羅辛質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口tamsulosin 英文名稱MouseBonemorphogeneticprotein7ELISAKit小鼠骨成型蛋白質(zhì)7(BMP-7)規(guī)格：96T/48T 大鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4 ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
(S)-坦索羅辛鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口(S)-Tamsulosin 冰凍切片結(jié)締組織(CONNECTIVETISSUE)馬森(MASSON)染色試劑盒50 人戊糖素(Peosidine)試劑盒 Human Peosidine ELISA Kit
替米沙坦-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Telmisartan-d3 Ratai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISA試劑盒大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅲ活性測試盒 可見分光光度法 25管/24樣
替米沙坦?；?/span>-β-D-葡萄糖苷酸-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Telmisartan-d3 Acyl-β-D-glucuronide 小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 RatphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISA試劑盒大鼠1脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
胰多肽，人Pancreatic Polypeptide,human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 英文名稱HumanCCL20ELISAKit人CCL20規(guī)格：96T/48T 人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
川續(xù)斷皂苷乙（標(biāo)準(zhǔn)品）Dipsacoside B質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 非同位素AP-BCIP/NBT法DNA南方雜交試劑盒5 小鼠型肝炎抗體(IgG)試劑盒 Mouse Hepatitis C virus aibody IgG ELISA Kit
野鳶尾黃素（標(biāo)準(zhǔn)品）Irisflorentin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitcath-K人組織蛋白酶K規(guī)格：48T/96T 旋毛蟲抗體(ichinella Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： ichinella Ab ELISA Kit
刺芒柄花苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Ononin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒 ，英文名： ADRA1A ELISA Kit MouseGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISA試劑盒小鼠糖原1酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
牛傳染性胸膜肺炎PCR試劑盒PCR級(jí)DMSO
Laemmli’s
電泳級(jí)1%溴酚藍(lán)溶液
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽性對照。
