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  • 無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒價(jià)格

無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒價(jià)格

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  • 型號(hào)
  • 品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時(shí)間2017-10-25
  • 廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
  • 入駐年限1
  • 實(shí)名認(rèn)證已認(rèn)證
  • 產(chǎn)品數(shù)量27
  • 人氣值567
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同類產(chǎn)品

上海同科生物科技有限公司成立于2007年,是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售和技術(shù)服務(wù)于一體專注于生物技術(shù)領(lǐng)域的高科技企業(yè)。

同科生物注重創(chuàng)新研發(fā),擁有市級(jí)工程技術(shù)研發(fā)中心,依托院士、國(guó)家千人計(jì)劃人才為導(dǎo)師顧問(wèn)的高效的化研發(fā)團(tuán)隊(duì),使得公司的核心研發(fā)產(chǎn)品在生命研究及細(xì)分市場(chǎng)占據(jù)一定地位。

同科生物奉行可持續(xù)發(fā)展的原則,將社會(huì)責(zé)任納入到企業(yè)發(fā)展的*戰(zhàn)略中。在企業(yè)的經(jīng)營(yíng)發(fā)展過(guò)程中,同科生物始終懷著感恩共享的心態(tài),努力做一個(gè)讓社會(huì)、客戶、員工和股東滿意的企業(yè)。

內(nèi)外兼修、*致遠(yuǎn)。面向未來(lái),以“同科向前,何勝不有!” 為拼搏奮進(jìn)的驅(qū)動(dòng)力,不斷提高創(chuàng)新能力、服務(wù)能力以及整合能力,高效運(yùn)營(yíng),以成為一家在生命領(lǐng)域里面提供*產(chǎn)品和服務(wù)的企業(yè)

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無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒價(jià)格 使用無(wú)胍鹽質(zhì)粒純化方法,zui高可以獲得高純度的質(zhì)粒50 μg,操作方便;過(guò)濾柱除去內(nèi)毒素,使內(nèi)毒素濃度<0.1 EU/µg;沒(méi)有鹽離子殘留,提高測(cè)序、連接、轉(zhuǎn)化和酶反應(yīng)效率。
無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒價(jià)格 產(chǎn)品詳情

產(chǎn)品名稱:無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒

英文名稱:Endo-Free plasmid mini kit

包裝規(guī)格

 

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品規(guī)格

價(jià)格

TB50009A

50 rxns

630

TB50009B

200 rxns

1970

 

 

有效期:本產(chǎn)品常溫(15-25℃) 干燥條件下可保存12個(gè)月。

無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒價(jià)格 產(chǎn)品原理和特點(diǎn):

無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒使用無(wú)胍鹽質(zhì)粒純化方法,zui高可以獲得高純度的質(zhì)粒50 μg,操作方便;過(guò)濾柱除去內(nèi)毒素,使內(nèi)毒素濃度<0.1 EU/µg;沒(méi)有鹽離子殘留,提高測(cè)序、連接、轉(zhuǎn)化和酶反應(yīng)效率。

無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒價(jià)格 使用前準(zhǔn)備事項(xiàng):

1、使用本產(chǎn)品前,請(qǐng)務(wù)必仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū);

2、EFW(70%乙醇)在使用前加入42 mL無(wú)水乙醇,混勻后使用;

3、Buffer RA在使用前加入RNase A,2-8℃保存。

4、檢查Buffer RB 有無(wú)沉淀。如有混濁現(xiàn)象,可在37 ℃水浴中加熱至澄清

5、全部操作均室溫進(jìn)行,低溫離心不利于酶去除 RNA;

6、從步驟“10”起,使用新的無(wú)內(nèi)毒素的槍頭轉(zhuǎn)移液體并小心操作,可避免引入新的內(nèi)毒素污染物。

 操作步驟:

1、取大腸桿菌過(guò)夜培養(yǎng)液 1~4 mL12,000 rpm室溫離心 1 min,棄上清收集菌體。

2、菌體中加入溶液 RA 200 µL,渦旋振蕩,充分混懸菌體。

*不要?dú)埩艟鷫K,會(huì)影響質(zhì)粒得率和純度。

3、加入溶液 RB 200 µL,立即溫和上下顛倒5-7次,使之充分混勻,室溫靜置3 min,形成透明溶液。

*不操作不可劇烈,以免震斷細(xì)菌基因組DNA;也不可超過(guò)5 min,以免破壞質(zhì)粒完整性。

4、加入溶液 RC 200 µL立即溫和地上下顛倒 5~7 次,使之充分混勻。加入100 µL無(wú)水乙醇,顛倒混勻。12,000 rpm室溫離心10 min。

5、將上清全部轉(zhuǎn)移至套有過(guò)濾柱的結(jié)合柱中。12,000 rpm 室溫離心 2 min,棄濾液。

6、結(jié)合柱放回,向結(jié)合柱內(nèi)650 μL 80%乙醇(自備),12,000 rpm室溫離心1 min,棄濾液

7、結(jié)合柱放回,12,000 rpm室溫2 min,除去結(jié)合柱內(nèi)殘留液體。

8、結(jié)合柱放入新的1.5mL離心管中,敞口室溫放置5~10 min 使乙醇充分揮發(fā)

*殘留乙醇將嚴(yán)重影響 DNA 洗脫。

9、結(jié)合中加200 μL Elution Buffer室溫靜置2~3 min,12,000 rpm室溫離心1 min,掉結(jié)合柱。

*Elution Buffer預(yù)熱至60 ℃左右,可以增加洗脫效率。

10、向洗脫液中加入Buffer RE 200  μL,顛倒混勻,室溫靜置5 min。

11、加入Buffer NE 140 μL,顛倒混勻,并移入Endo-free過(guò)濾柱中,靜置5~10 min。12,000 rpm室溫離心2 min棄過(guò)濾柱。

*靜置5~10 min可使絮狀物分層,利于過(guò)濾。棄過(guò)濾柱前,確認(rèn)無(wú)液體殘留,否則再次離心過(guò)濾。

12、向?yàn)V液中加入等體積的異丙醇(或者兩倍體積的無(wú)水乙醇,自備),顛倒混勻后室溫放置15 min,10,000 rpm離心15 min棄上清。

13、加入500 μL EFW(70%乙醇)洗滌沉淀,12,000 rpm室溫離心5 min棄上清。

14、重復(fù)步驟“13,盡可能棄上清。

15、敞口放置 5~10 min,使乙醇揮發(fā),用適量EFW溶解沉淀。

常見(jiàn)問(wèn)題解析:

質(zhì)粒得率低可能原因及解決辦法:

1、菌體未活化,生*率低,菌量少,需要活化菌種

2、屬于低拷貝質(zhì)粒。增加菌液的量

3、Buffer RB 裂解不充分。

質(zhì)粒純度差可能原因:

1、未加入RNase A 或RNase A未4 ℃保存

2、加入Buffer RB 劇烈震蕩,使得基因組斷裂;

3、加入Buffer RC 操作慢,形成微小沉淀,蛋白質(zhì)無(wú)法被充分漂洗干凈;

4、OD260/OD280 比值一般在 1.8-2.0 之間,小于 1.8 可能有蛋白污染,大于 2.0 有部分降解或 RNA 污染。

 

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