購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細胞價格并預約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。產(chǎn)品僅用于科研
| 產(chǎn)品名稱 | XL1-Blue 電擊感受態(tài)細胞 50ul*20 |
| 包裝 | 50ul*20 |
| 分類 | 克隆感受態(tài)細胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
2-吡啶乙腈 2739-97-1
3-溴-4-氟* 27407-11-0
1,2-亞甲二氧基苯 274-09-9
L-(-)-二苯甲酰 2743-38-6
4-甲氧基溴芐 2746-25-0
反式對氨基環(huán)己醇 27489-62-9
L-氨基丙醇 2749-11-3
四苯基溴化 2751-90-8
*叔丁酯鹽酸鹽 27532-96-3
二鉬酸銨 27546-07-2
二硫代蘇糖醇 27565-41-9
1-(2-氨乙基)哌啶 27578-60-5
3-甲基-2-環(huán)戊烯-1-酮 2758-18-1
1XL1-Blue 電擊感受態(tài)細胞 50ul*20-芐基甲酸 2759-17-3
三氟甲磺酸*基硅酯 27607-77-8
Boc-L-*甲酯 2766-43-0
5-氯噻唑-2-磺酰氯 2766-74-7
Cbz-DL-* 2768-56-1
二乙基膦酰基乙酸叔丁酯 27784-76-5
5-羥基* 27828-71-3
2,5-二甲氧基苯甲酸 2785-98-0
L-乳酸甲酯 27871-49-4
(R)-(-)-1-氨基-2-丙醇 2799-16-8
S-1-氨基-2-丙醇 2799-17-9
2-氯-6-三氟甲基* 28056
PI Ab-IgG/IgM 大鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 規(guī)格： 48T/96T
PL-A2 大鼠磷脂酶A2 規(guī)格： 48T/96T
PI3K 大鼠磷酸肌醇3激酶 規(guī)格： 48T/96T
pACCase 大鼠磷酸化乙酰*羧化酶 規(guī)格： 48T/96T
AMPK 大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶 規(guī)格： 48T/96T
pERK 大鼠磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶 規(guī)格： 48T/96T
P-PKC 大鼠磷酸化蛋白激酶C 規(guī)格： 48T/96T
大鼠淋巴細胞因子ELISA Kit，48T/96T 大鼠淋巴細胞因子ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T
Lptn/LTN/XCL1 大鼠淋巴細胞趨化因子 規(guī)格： 48T/96T
LFA-3/CD58 大鼠淋巴細胞功能相關(guān)抗原3 規(guī)格： 48T/96T
GM-CSF 大鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子 規(guī)格： 48T/96T
G-CSF 大鼠粒細胞集落刺激因子 規(guī)格： 48T/96T
CC16 大鼠克拉拉細胞蛋白 規(guī)格： 48T/96T
sTRAIL 大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體 規(guī)格： 48T/96T
sPECAM-1 大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細胞粘附分子1 規(guī)格： 48T/96T
sVCAM-1 大鼠可溶性血管細胞粘附分子1 規(guī)格： 48T/96T
sEPCR 大鼠可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體 規(guī)格： 48T/96T
SBA 大豆凝集素 規(guī)格： 48T/96T
E.coli P 大腸桿菌宿主殘留蛋白檢測試劑盒 規(guī)格： 48T/96T
cath-K 倉鼠組織蛋白酶K 規(guī)格： 48T/96T
TBG 倉鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白 規(guī)格： 48T/96T
MMP-9 倉鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B 規(guī)格： 48T/96T
RANKL 倉鼠核因子κB受體活化因子配基 規(guī)格： 48T/96T
PHA 菜豆凝集素 規(guī)格： 48T/96T
LCA 扁豆凝集素 規(guī)格： 48T/96T
RCA 蓖麻凝集素 規(guī)格： 48T/96T
α-BGT α-銀環(huán)蛇毒素 規(guī)格： 48T/96T
6-45-2
注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。
