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| 產(chǎn)品名稱 | JM110 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50 |
| 包裝 | 100ul*50 |
| 分類 | 克隆感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。
CFH 大鼠補(bǔ)體因子H 規(guī)格： 48T/96T
C5a 大鼠補(bǔ)體片斷5a 規(guī)格： 48T/96T
C3a 大鼠補(bǔ)體片斷3a 規(guī)格： 48T/96T
C4 大鼠補(bǔ)體蛋白4 規(guī)格： 48T/96T
C3 大鼠補(bǔ)體蛋白3 規(guī)格： 48T/96T
M2-PK 大鼠丙酮酸激酶M2型同工酶 規(guī)格： 48T/96T
MDA 大鼠丙二醛 規(guī)格： 48T/96T
EGF 大鼠表皮生長(zhǎng)因子 規(guī)格： 48T/96T
PY 大鼠吡啶交聯(lián)物 規(guī)格： 48T/96T
BTA 大鼠膀胱腫瘤抗原 規(guī)格： 48T/96T
Cys-C 大鼠半*蛋白酶抑制劑/胱抑素C 規(guī)格： 48T/96T
LIFR 大鼠白血病抑制因子受體 規(guī)格： 48T/96T
JM110 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50ALCAM 大鼠白細(xì)胞活化黏附因子 規(guī)格： 48T/96T
CD44 大鼠白細(xì)胞分化抗原44 規(guī)格： 48T/96T
CD30 大鼠白細(xì)胞分化抗原30 規(guī)格： 48T/96T
LTE4 大鼠白三烯E4 規(guī)格： 48T/96T
LTC4 大鼠白三烯C4 規(guī)格： 48T/96T
LTB4 大鼠白三烯B4 規(guī)格： 48T/96T
IL-4 大鼠白介素4 規(guī)格： 48T/96T
IL-3 大鼠白介素3 規(guī)格： 48T/96T
IL-2R 大鼠白介素2受體 規(guī)格： 48T/96T
IL-2sRβ 大鼠白介素2可溶性受體β鏈 規(guī)格： 48T/96T
IL-2sRα 大鼠白介素2可溶性受體α鏈 規(guī)格： 48T/96T
IL-27 大鼠白介素27 規(guī)格： 48T/96T
IL-23 大鼠白介素23 規(guī)格： 48T/96T
IL-2 大鼠白介素2 規(guī)格： 48T/96T
IL1Ra 大鼠白介素1受體拮抗劑 規(guī)格
3-氨基丙酸甲酯鹽酸鹽 3196-73-4
氟化氫吡啶 32001-55-1
雙(二亞芐基丙酮)鈀 32005-36-0
3,5-二氟環(huán)己醇 32085-88-4
2,3-二氯硝基苯 3209-22-1
2-硝基-4-三氟甲基苯甲酸 320-94-5
2-氟-4-溴硝基苯 321-23-3
嘧啶-5-硼酸嚬哪醇酯 321724-19-0
L-天冬氨酸二甲酯鹽酸鹽 32213-95-9
5-甲基* 3222-49-9
4-甲基吡啶-3-羧酸 3222-50-2
2-甲基* 3222-56-8
3,5-雙三氟甲基芐基溴 32247-96-4
3-環(huán)丙基-3-氧代丙酸甲酯 32249-35-7
二(三氯甲基)碳酸酯 32315-10-9
嗎啉-4-基乙酸 3235-69-6
碘苯二乙酸 3240-34-4
四丁基硫酸氫銨 32503-27-8
硝酸銅 3251-23-8
對(duì)甲基* 3261-62-9
BOC-L-* 3262-72-4
D-(+)-二對(duì)甲基苯甲酰酒石酸 32634-68-7
2-噻吩甲酰三氟丙酮 326-91-0
5-硝基二氫吲哚 32692-19-6
L-2-* 327-57-1
2-氨基-5-氰基三氟甲苯 327-74-2
5-溴-2-氯嘧啶 32779-36-5
2-羥基-6-甲基吡啶 3279-76-3
： 48T/96T
IL-1sRⅡ 大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ 規(guī)格： 48T/96T
IL-1sRⅠ 大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ 規(guī)格： 48T/96T
注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。
