購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實驗操作。產(chǎn)品僅用于科研
| 產(chǎn)品名稱 | JM109 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*100 |
| 包裝 | 100ul*100 |
| 分類 | 克隆感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
FASL 大鼠凋亡相關(guān)因子配體 規(guī)格： 48T/96T
FAS/CD95 大鼠凋亡相關(guān)因子 規(guī)格： 48T/96T
FⅧAg 大鼠第八因子相關(guān)抗原 規(guī)格： 48T/96T
Resistin 大鼠抵抗素 規(guī)格： 48T/96T
HIF-1α 大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α 規(guī)格： 48T/96T
LDL-IC 大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物 規(guī)格： 48T/96T
大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA Kit，48T/96T 大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T
PP 大鼠蛋白磷酸酶 規(guī)格： 48T/96T
PKB 大鼠蛋白激酶B 規(guī)格： 48T/96T
JM109 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*100CCK 大鼠膽囊收縮素/腸促*肽 規(guī)格： 48T/96T
CETP 大鼠*酯轉(zhuǎn)移蛋白 規(guī)格： 48T/96T
MCP-4/CCL13 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4 規(guī)格： 48T/96T
MCP-3/CCL7 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3 規(guī)格： 48T/96T
MCP-2/CCL8 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2 規(guī)格： 48T/96T
MCP-1/CCL2/MCAF 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1 規(guī)格： 48T/96T
Big ET 大鼠大內(nèi)皮素 規(guī)格： 48T/96T
Big ET 大鼠大內(nèi)皮素 規(guī)格： 48T/96T
PRL 大鼠催乳素 規(guī)格： 48T/96T
GNRHR-Ab 大鼠*釋放激素受體抗
4-三氟甲氧基苯腈 332-25-2
6-氯-3-氰基吡啶 33252-28-7
2-氯-4-氰基吡啶 33252-30-1
2-羥基-5-三氟甲基吡啶 33252-63-0
4-氯吡啶-3-磺酰胺 33263-43-3
乙二胺鹽酸鹽 333-18-6
硫氰酸鉀 333-20-0
5-氯吡嗪-2-羧酸甲酯 33332-25-1
1,4-丁二胺二鹽 333-93-7
2-氯-5-氟甲苯 33406-96-1
4-(三氟甲基)-1H-咪唑 33468-69-8
3-氨基-2-羥基吡啶 33630-99-8
3-溴硫代苯甲醚 33733-73-2
DL-半* 3374-22-9
醋酸鈀 3375-31-3
1-溴-3-氯-5-氟苯 33863-76-2
D-* 338-69-2
3-溴丙酸甲酯 3395-91-3
乙酸銫 3396-11-0
環(huán)戊酸 3400-45-1
3,4-二氟環(huán)己醇 34036-07-2
6-溴吡啶-2-甲醛 34160-40-2
4-甲氧基苯甲酰胺 3424-93-9
規(guī)格： 48T/96T
GnRHR 大鼠*釋放激素受體 規(guī)格： 48T/96T
注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。
