購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。產(chǎn)品僅用于科研
| 產(chǎn)品名稱 | TG1 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10 |
| 包裝 | 100ul*10 |
| 分類 | 克隆感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
anti-HAV 人抗甲型肝炎病毒IgG抗體 規(guī)格： 48T/96T
EMA IgA 人抗肌內(nèi)膜抗體IgA 規(guī)格： 48T/96T
TTN 人抗肌聯(lián)蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T
AAA 人抗肌動蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T
CCP 人抗環(huán)胍氨酸肽抗體 規(guī)格： 48T/96T
RSV 人抗呼吸道合胞病毒抗體 規(guī)格： 48T/96T
RBC 人抗紅細(xì)胞抗體 規(guī)格： 48T/96T
APF 人抗核周因子抗體 規(guī)格： 48T/96T
ANF 人抗核因子抗體 規(guī)格： 48T/96T
AnuA-IgG 人抗核小體抗體IgG 規(guī)格： 48T/96T
ARPA/Rib-P 人抗核糖體P蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T
TG1 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10RNP-Ab 人抗核糖核蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T
AFA/snoRNP/U3RNP 人抗核仁纖維蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T
ANA 人抗核仁抗體 規(guī)格： 48T/96T
gp210 人抗核膜糖蛋白210抗體 規(guī)格： 48T/96T
ANA 人抗核抗體 規(guī)格： 48T/96T
ASA 人抗骨骼肌抗體 規(guī)格： 48T/96T
anti-tox IgM 人抗弓形體IgM抗體 規(guī)格： 48T/96T
anti-tox IgG 人抗弓形體IgG抗體 規(guī)格： 48T/96T
AGAA 人抗高爾基體抗體 規(guī)格： 48T/96T
LMA 人抗肝細(xì)胞膜抗體 規(guī)格： 48T/96T
LC1 人抗肝細(xì)胞胞質(zhì)1型抗體 規(guī)格： 48T/96T
LSP 人抗肝特異性脂蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T
LSP 人抗肝特異性脂蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T
LKM 人抗肝腎微粒體抗體 規(guī)格
*化亞砜 1774-47-6
正丙基硼酸 17745-45-8
4-甲基-3-噻吩硼酸 177735-11-4
四甲基氟化銨 17787-40-5
1-Boc-2-氨甲基吡咯烷 177911-87-4
甲基三苯基溴化 1779-49-3
4,6-二氯-2-甲基嘧啶 1780-26-3
2,4,6-三氯-5-甲基嘧啶 1780-36-5
2-氟-6-硝基苯胺 17809-36-8
3-氨基茴香硫醚 1783-81-9
D-天* 1783-96-6
對肼基苯磺酰胺鹽酸鹽 17852-52-7
4-(甲基磺?；?苯肼鹽酸鹽 17852-67-4
鉻黑 T 1787-61-7
2,6-二氯-3-氟苯甲酸 178813-78-0
4-N-Boc-氨基環(huán)己酮 179321-49-4
異氰酸異丙酯 1795-48-8
2-氟-5-溴苯腈 179897-89-3
3-溴-5-氟苯腈 179898-34-1
4-羧基苯硼酸頻那醇酯 180516-87-4
叔丁基二甲基氯硅烷 18162-48-6
3-氨基吡唑 1820-80-0
2-氨基6-甲基吡啶 1824-81-3
乙烯基溴化鎂 1826-67-1
： 48T/96T
注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。
