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| 產(chǎn)品名稱 | Stbl3 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10 |
| 包裝 | 100ul*10 |
| 分類 | 克隆感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
ARA 人抗網(wǎng)硬蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T
SDA 人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體 規(guī)格： 48T/96T
DNP-Ab 人抗脫氧核糖核蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T
PsmAb 人抗突觸前膜抗體 規(guī)格： 48T/96T
MCV 人抗突變型瓜氨酸波型蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T
MCV 人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T
aZP 人抗透明帶抗體 規(guī)格： 48T/96T
n-DNA-Ab 人抗天然脫氧核糖核酸抗體 規(guī)格： 48T/96T
glycolipid 人抗糖脂抗體 規(guī)格： 48T/96T
GP 人抗糖蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T
MAG 人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T
anti-myelin Ab 人抗髓磷脂抗體IgA 規(guī)格： 48T/96T
anti-myelin Ab 人抗髓磷脂抗體IgA 規(guī)格： 48T/96T
Stbl3 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10dsDNA 人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體 規(guī)格： 48T/96T
HAMA 人抗鼠抗體 規(guī)格： 48T/96T
GHAb 人抗生長激素抗體 規(guī)格： 48T/96T
GHAb 人抗生長激素抗體 規(guī)格： 48T/96T
GBM 人抗腎小球基底膜抗體 規(guī)格： 48T/96T
TBM 人抗腎小管
N(e)-Boc-L-賴氨酸 2418-95-3
3-氯-4-羥基環(huán)己醇 2420-16-8
2-氨基-3,5-二溴吡嗪 24241-18-7
L-4-溴苯* 24250-84-8
2,6-二氯-4-三氟三異丙酯 24279-39-8
2-乙?；邕?24295-03-2
3,4,5-*氧基苯胺 24313-88-0
4,6-二氨基嘧啶 2434-56-2
2-溴苯基硼酸 244205-40-1
二碳酸二叔丁酯 24424-99-5
4-芐氧基吡啶 N-氧化物 2683-66-1
芐氧基胺鹽酸鹽 2687-43-6
6-溴-1-己烯 2695-47-8
聚(六亞甲基雙氰基胍-六亞甲基二胺)鹽酸鹽 27083-27-8
(R)-1-叔丁氧羰基-3-(氨基甲基)吡咯烷 270912-72-6
3,5-雙三氟甲基苯腈 27126-93-8
[雙(三氟乙酰氧基)碘]苯 2712-78-9
6-氮雜吲哚 271-29-4
3,5-二氟* 2713-34-0
5-氮雜吲哚 271-34-1
7-氮雜吲哚 271-63-6
氧茚 271-89-6
環(huán)己甲酰氯 2719-27-9
3-溴苯肼鹽酸鹽 27246-81-7
4-氮雜吲哚 272-49-1
5-甲醛基呋喃-2-硼酸 27329-70-0
基底膜抗體 規(guī)格： 48T/96T
注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。
