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| 產品名稱 | DB3.1 電擊感受態(tài)細胞 50ul*5 |
| 包裝 | 50ul*5 |
| 分類 | 克隆感受態(tài)細胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
BOC-D-* 16937-99-8
硼氫 16940-66-2
六氟磷酸 16940-81-1
六氟磷酸銨 16941-11-0
N-叔丁氧羰基-L-* 15761-38-3
2-(羥甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯 157634-00-9
對甲苯磺酰肼 1576-35-8
1-叔丁氧羰基-4-哌啶乙酸 157688-46-5
1-甲基-4-溴吡唑 15803-02-8
6-氰基吲哚 15861-36-6
(S)-甲酸-2-羧酸二鹽158663-69-5
鹽酸利莫那班 158681-13-1
3-甲氧基-1-丙醇 1589-49-7
二聚醋酸銠 15956-28-2
N-Boc-4-亞甲基哌啶 159635-49-1
2-氨基-6-氟吡啶 1597-32-6
4-(氨甲基)苯腈鹽酸鹽 15996-76-6
汞 1600-27-7
碘代*硅烷 16029-98-4
2-氨基-5-甲基吡啶 1603-41-4
S-環(huán)氧丙烷 16088-62-3
叔丁基異氰酸酯 1609-86-5
2,5-二氯吡啶 16110-09-1
3,5-二溴甲苯 16
PIPLC 人磷酯酰肌醇特異性磷酯酶C 規(guī)格： 48T/96T
PLCγ1 人磷酯酶Cγ鏈 規(guī)格： 48T/96T
PLC 人磷酯酶C 規(guī)格： 48T/96T
PI Ab-IgG/IgM 人磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 規(guī)格： 48T/96T
DB3.1 電擊感受態(tài)細胞 50ul*5GPC-3 人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 規(guī)格： 48T/96T
PL-A2 人磷脂酶A2 規(guī)格： 48T/96T
PCK 人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 規(guī)格： 48T/96T
PGM 人磷酸葡萄糖變位酶 規(guī)格： 48T/96T
PI3K 人磷酸肌醇3激酶 規(guī)格： 48T/96T
PaCoA 人磷酸化乙酰* 規(guī)格： 48T/96T
pERK 人磷酸化細胞外信號調節(jié)激酶 規(guī)格： 48T/96T
P-PKC 人磷酸化蛋白激酶C 規(guī)格： 48T/96T
PGAM2 人磷酸甘油酸變位酶2 規(guī)格： 48T/96T
人淋巴細胞因子ELISA Kit，48T/96T 人淋巴細胞因子ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T
Lptn/LTN/XCL1 人淋巴細胞趨化因子 規(guī)格： 48T/96T
LFA-3/CD58 人淋巴細胞功能相關抗原3 規(guī)格： 48T/96T
LFA-2/CD2 人淋巴細胞功能相關抗原2 規(guī)格
11-92-3
注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?；蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。
