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| 產(chǎn)品名稱 | stable 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*5 |
| 包裝 | 50ul*5 |
| 分類 | 克隆感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。
uà shì jì 輔羧酶 容量： 1公斤
shēng huà shì jì * 容量： RT 10克
shēng huà shì jì 福氏*佐劑 容量： 1公斤
shēng huà shì jì 福氏不*佐劑 容量： RT 250克
shēng huà shì jì 福林酚 容量： 2～8℃ 25毫克
shēng huà shì jì 氟鈦酸鉀 容量： RT 250克
shēng huà shì jì 氟鈦酸銨 容量： 5克
shēng huà shì jì 氟硼酸鈉 容量： 10克
shēng huà shì jì 氟硼酸鉀 容量： RT 500毫升
shēng huà shì jì 氟硼酸銨 容量： RT 1克
shēng huà shì jì 氟鋁酸鈉 容量： 2～8℃ 1克
shēng huà shì jì 氟鋁酸鉀 容量： 25克
shēng huà shì jì 氟鋁酸銨 容量： 5克
stable 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*5shēng huà shì jì 氟化鈰 容量： RT 10克
shēng huà shì jì 氟化氫銨 容量： 500克
shēng huà shì jì 氟化釹 容量： RT 25克
shēng huà shì jì 氟化鎳 容量： RT 25克
shēng huà shì jì 氟化鈉 容量： 100克
shēng huà shì jì 氟化鎂 容量： 100克
shēng huà shì jì 氟化鉀 容量： RT 100克
shēng huà shì jì 氟化鈣 容量： RT 100克
shēng huà shì jì 氟化銨 容量： RT 5克
shēng huà shì jì 氟硅酸 容量： RT 25克
shēng huà shì jì * 容量： 25克
shēng huà shì jì 孵育盒
BCR 人B細(xì)胞受體 規(guī)格： 48T/96T
BCGF 人B細(xì)胞生長(zhǎng)因子 規(guī)格： 48T/96T
Bcl-2 人B細(xì)胞淋巴瘤因子2 規(guī)格： 48T/96T
BLNK 人B細(xì)胞連接蛋白 規(guī)格： 48T/96T
BAFF-R 人B細(xì)胞活化因子受體 規(guī)格： 48T/96T
BCDF 人B細(xì)胞分化因子 規(guī)格： 48T/96T
BLC-1/CXCL13 人B-淋巴細(xì)胞趨化因子1 規(guī)格： 48T/96T
Bid 人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白 規(guī)格： 48T/96T
BAX 人Bcl-2相關(guān)X蛋白 規(guī)格： 48T/96T
ASP 人A組鏈球菌菌壁多糖抗體 規(guī)格： 48T/96T
AP12 人apelin 12 規(guī)格： 48T/96T
AGRP 人Agouti相關(guān)蛋白 規(guī)格： 48T/96T
AGRP 人Agouti相關(guān)蛋白 規(guī)格： 48T/96T
8-iso-PG 人8異前列腺素 規(guī)格： 48T/96T
8-epi-PGF2α 人8-異構(gòu)前列腺素F2α 規(guī)格： 48T/96T
8-OHdG 人8羥基脫氧鳥(niǎo)苷 規(guī)格： 48T/96T
6-keto-PGF1a 人6酮前列腺素F1a 規(guī)格： 48T/96T
6-K-PG 人6酮前列腺素 規(guī)格： 48T/96T
6-OHDA 人6-羥多巴胺 規(guī)格： 48T/96T
5-LO/LOX 人5脂加氧酶 規(guī)格： 48T/96T
5-HT 人5羥色胺 規(guī)格： 48T/96T
5-HIAA 人5羥基吲哚乙酸 規(guī)格： 48T/96T
5-NT 人5核苷酸酶 規(guī)格： 48T/96T
Col Ⅳ 人Ⅳ型膠原 規(guī)格： 48T/96T
容量： 12毫升
注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無(wú)菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開(kāi)，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。
