購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細胞價格并預約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。產(chǎn)品僅用于科研

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

shēng huà shì jì * 容量： RT 25克
shēng huà shì jì 水合肼 容量： 10毫克
shēng huà shì jì 水飽和酚 容量： 0.25毫升
shēng huà shì jì 雙重酯酶染液 容量： 20片/箱
shēng huà shì jì 雙洗瓊脂平板 容量： 1米
shēng huà shì jì 雙岐桿菌生化基礎培養(yǎng)基 容量： 100克
shēng huà shì jì 雙岐桿菌BS培養(yǎng)基 容量： 100毫升
shēng huà shì jì 雙硫腙 容量： 500克
shēng huà shì jì 雙料乳糖膽鹽胨水 容量： RT 支
shēng huà shì jì 雙環(huán)己酮草酰二腙 容量： 500克
shēng huà shì jì 雙甘氨肽 容量： 100毫克
shēng huà shì jì 雙道定時鐘 容量： 保存：-20℃ 1克
shēng huà shì jì 雙丙氨膦 容量： 25克
shēng huà shì jì 雙吡唑酮 容量： 25克
shēng huà shì jì 雙[三（羥甲基）氨基甲烷] 容量： 5毫克
shēng huà shì jì 雙[三（羥甲基）氨基丙烷] 容量： 25毫克
shēng huà shì jì 曙紅Y(水溶) 容量： 100克
shēng huà shì jì 曙紅Y(醇溶) 容量： 100克
shēng huà shì jì 曙紅B 容量： 100克
shēng huà shì jì 鼠抗人雌激素受體單克隆抗體 容量： 10片/箱
shēng huà shì jì 疏水硅烷 容量： 保存：-20℃ 100u
shēng huà shì jì 叔丁基苯腈肟碳酸酯 容量： 保存：-20℃ 10毫克
shēng huà shì jì 叔丁醇 容量： 0.5毫升
shēng huà shì jì 嗜鹽菌選擇性瓊脂 容量： 500毫升
shēng huà shì jì 嗜酸粒細胞直接計數(shù)液 容量： 500克
MG1655 感受態(tài)細胞 100ul*10shēng huà shì jì 示蛋白胨（魚粉） 容量： 10克
shēng huà shì jì 石油醚 容量： 50

 C3b 人補體片斷3b 規(guī)格： 48T/96T

 C3b 人補體片斷3b 規(guī)格： 48T/96T

 C3a 人補體片斷3a 規(guī)格： 48T/96T

 C3bR 人補體片段3b受體 規(guī)格： 48T/96T

 CCP 人補體調(diào)節(jié)蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 C4 人補體蛋白4 規(guī)格： 48T/96T

 C3 人補體蛋白3 規(guī)格： 48T/96T

 C7 人補體7 規(guī)格： 48T/96T

 C3SP 人補體3裂解產(chǎn)物 規(guī)格： 48T/96T

 C1INH 人補體1抑制物抗體 規(guī)格： 48T/96T

 VN/CD51+CD61 人玻連蛋白/體外粘連蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 VIM 人波形蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 HCV-IgM 人丙型肝炎IgM 規(guī)格： 48T/96T

 HCV-IgG 人丙型肝炎IgG 規(guī)格： 48T/96T

 M2-PK 人丙酮酸激酶M2型同工酶 規(guī)格： 48T/96T

 PK 人丙酮酸激酶 規(guī)格： 48T/96T

 MDA 人丙二醛 規(guī)格： 48T/96T

 ALT/GPT 人*轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶 規(guī)格： 48T/96T

 CAPF 人表皮細胞活化肽因子 規(guī)格： 48T/96T

 EGF 人表皮生長因子 規(guī)格： 48T/96T

 EK 人表皮角蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 mIgM 人表面膜免疫球蛋白M 規(guī)格： 48T/96T

0克

注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
 5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。