購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細胞價格并預約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。產(chǎn)品僅用于科研
| 產(chǎn)品名稱 | GV3101（pJlC SA-rep）感受態(tài)細胞 100ul*50 |
| 包裝 | 100ul*50 |
| 分類 | 表達感受態(tài)細胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
人類白細胞抗原B27 規(guī)格： 48T/96T
TA 人抗磷壁酸抗體 規(guī)格： 48T/96T
ALG 人抗淋巴細胞球蛋白 規(guī)格： 48T/96T
ALA 人抗淋巴細胞抗體 規(guī)格： 48T/96T
ASO 人抗鏈球菌溶血素O/抗O 規(guī)格： 48T/96T
ADH/VP/AVP 人抗利尿激素/*加壓素 規(guī)格： 48T/96T
SCA 人抗類固醇細胞抗體 規(guī)格： 48T/96T
RANA 人抗類風濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體 規(guī)格： 48T/96T
RANA 人抗類風濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體 規(guī)格： 48T/96T
anti-RV 人抗狂犬病毒抗體 規(guī)格： 48T/96T
anti-RV 人抗狂犬病毒抗體 規(guī)格： 48T/96T
GV3101（pJlC SA-rep）感受態(tài)細胞 100ul*50 ENA-Ab 人抗可提取核抗原抗體 規(guī)格： 48T/96T
SLA 人抗可溶性肝抗原抗體 規(guī)格： 48T/96T
Attacin 人抗菌肽 規(guī)格： 48T/96T
anti-CMV IgM 人抗巨細胞病毒抗體IgM 規(guī)格： 48T/96T
anti-CMV IgM 人抗巨細胞病毒抗體IgM 規(guī)格： 48T/96T
anti-CMV IgG 人抗巨細胞病毒抗體IgG 規(guī)
shēng huà shì jì 蛋白酶K溶液 容量： 5克
shēng huà shì jì 蛋白酶K 容量： RT 1克
shēng huà shì jì 蛋白酶（枯草桿菌） 容量： RT 1克
shēng huà shì jì 蛋白胨水培養(yǎng)基 容量： 5克
shēng huà shì jì 蛋白胨 容量： 25克
shēng huà shì jì 蛋白標準品（總蛋白、白蛋白） 容量： RT 96支/盒
shēng huà shì jì 蛋白保護劑TY 容量： 5克
shēng huà shì jì 蛋白A瓊脂糖凝膠CL-4B 容量： 1克
shēng huà shì jì 蛋白A 容量： 100毫克
shēng huà shì jì 彈性蛋白酶(豬胰) 容量： 2～8℃，避光 10克
shēng huà shì jì 但馬膠 容量： 50毫克
shēng huà shì jì 膽鹽乳糖培養(yǎng)基 容量： 50克
shēng huà shì jì 膽鹽七葉苷瓊脂 容量： 25毫升
shēng huà shì jì 膽酸鈉（豬） 容量： 2～8℃ 1克
shēng huà shì jì 膽酸（牛） 容量： 500克
shēng huà shì jì 膽硫乳瓊脂 容量： 100克
shēng huà shì jì *脂酶測試盒 容量： RT 50支/包
格： 48T/96T
注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。
