購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。產(chǎn)品僅用于科研
| 產(chǎn)品名稱 | EHA101 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*100 |
| 包裝 | 100ul*100 |
| 分類 | 根癌農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動(dòng)會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。
17-OHP 人17羥孕酮 規(guī)格： 48T/96T
17-OHCS 人17羥皮質(zhì)類固醇 規(guī)格： 48T/96T
16-α OHE-1 人16α羥基雌酮1 規(guī)格： 48T/96T
15-LO/LOX 人15脂加氧酶 規(guī)格： 48T/96T
12-HETE 人12羥二十烷四烯酸 規(guī)格： 48T/96T
11-DH-TXB2 人11去氫血栓烷B2 規(guī)格： 48T/96T
1,3-βD glucosidase 人1,3-βD葡葡糖苷酶 規(guī)格： 48T/96T
OH 人1,25二羥基*3 規(guī)格： 48T/96T
HIS 犬組胺 規(guī)格： 48T/96T
TGF-β1 犬轉(zhuǎn)移生長因子β1 規(guī)格： 48T/96T
MHC/DLA 犬主要組織相容性復(fù)合體 規(guī)格： 48T/96T
PROG 犬孕激素/孕酮 規(guī)格： 48T/96T
EHA101 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*100 HBsAg 犬乙型肝炎表面抗原 規(guī)格： 48T/96T
AChRab 犬乙酰*受體抗體 規(guī)格： 48T/96T
ISR-β 犬胰島素受體β 規(guī)格： 48T/96T
INS 犬胰島素 規(guī)格： 48T/96T
FA 犬* 規(guī)格： 48T/96T
TXB2 犬血栓素B2 規(guī)格： 48T/96T
TpP 犬血栓前體蛋白 規(guī)格： 48T/96T
TM 犬血栓調(diào)節(jié)蛋白 規(guī)格： 48T/96T
Thymosin α1 犬*α1 規(guī)格：
jì Na-對甲苯磺酰-L-苯*氯甲基酮 容量： 25毫升
shēng huà shì jì Na-苯甲酰-L-精氨酰胺鹽酸鹽 容量： 25毫克
shēng huà shì jì Na-苯甲酰-L-*乙酯鹽酸鹽 容量： 1克
shēng huà shì jì NAC瓊脂培養(yǎng)基 容量： RT 25克
shēng huà shì jì N6-異戊烯基腺嘌呤 容量： 保存：-20℃ 1克
shēng huà shì jì N6-苯甲酰基腺嘌呤 容量： 5克
shēng huà shì jì N，N-二異丙基碳二亞胺 容量： 2～8℃ 5克
shēng huà shì jì N,N-二乙基甲酰胺 容量： 50毫克
shēng huà shì jì N,N-二甲基乙酰胺 容量： 2～8℃ 5毫克
shēng huà shì jì N，N-二環(huán)己基碳二亞胺 容量： 500克
shēng huà shì jì N,N,N,N-四甲基乙二胺 容量： 保存：-20℃，避光 25毫克
shēng huà shì jì N-（γ-L-谷氨酰）-2-萘胺 容量： RT 25克
shēng huà shì jì N-（γ-L-谷氨酰）-1-萘胺 容量： 500克
shēng huà shì jì N-(2-乙酰胺基)-2-亞氨基二乙酸 容量： 保存：-20℃ 10次/30ul/支
shēng huà shì jì N-(2-乙酰氨基)-亞氨基二乙酸二鈉鹽 容量： 30次/100ul/支
shēng huà shì jì N-（2-乙酰氨基）-2-氨基乙烷磺酸 容量： 保存：-20℃ 20次/160ul/支
shēng huà shì jì M-肉湯 容量： 500克
shēng huà shì jì mTSB肉湯 容量： 25克
shēng huà shì jì M-TGE肉湯 容量： 500毫升
shēng huà shì jì M-TEC瓊脂 容量： 2～8℃ 25毫升
shēng huà shì jì MR-VP培養(yǎng)基 容量： 100克
注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過長，長時(shí)間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。
