購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細胞價格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。產(chǎn)品僅用于科研
| 產(chǎn)品名稱 | Ar Qual 電擊感受態(tài)細胞 50ul*10 |
| 包裝 | 50ul*10 |
| 分類 | 發(fā)根農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
shēng huà shì jì 聚乙二醇6000 容量： 500克
shēng huà shì jì 聚乙二醇600 容量： 1克
shēng huà shì jì 聚乙二醇4000 容量： RT 100克
shēng huà shì jì 聚乙二醇400 容量： 保存：-20℃ 100毫克
shēng huà shì jì 聚乙二醇300 容量： 5克
shēng huà shì jì 聚乙二醇20000 容量： 250毫克
shēng huà shì jì 聚乙二醇2000 容量： 25克
shēng huà shì jì 聚乙二醇200 容量： 保存：-20℃ 1克
shēng huà shì jì 聚乙二醇1500 容量： 5克
shēng huà shì jì 聚乙
IgA 大鼠免疫球蛋白A 規(guī)格： 48T/96T
OVA sIgE 大鼠卵清蛋白特異性IgE 規(guī)格： 48T/96T
大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA Kit，48T/96T 大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA Kit，
Ar Qual 電擊感受態(tài)細胞 50ul*1048T/96T 規(guī)格： 48T/96T
TrxR 大鼠硫氧還蛋白還原酶 規(guī)格： 48T/96T
Trx 大鼠硫氧化還原蛋白 規(guī)格： 48T/96T
PI Ab-IgG/IgM 大鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 規(guī)格： 48T/96T
PL-A2 大鼠磷脂酶A2 規(guī)格： 48T/96T
PI3K 大鼠磷酸肌醇3激酶 規(guī)格： 48T/96T
pACCase 大鼠磷酸化乙酰*羧化酶 規(guī)格： 48T/96T
AMPK 大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶 規(guī)格： 48T/96T
pERK 大鼠磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶 規(guī)格： 48T/96T
P-PKC 大鼠磷酸化蛋白激酶C 規(guī)格： 48T/96T
大鼠淋巴細胞因子ELISA Kit，48T/96T 大鼠淋巴細胞因子ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格：
容量： 1公斤
shēng huà shì jì 聚乙二醇1000 容量： 2～8℃ 1克
shēng huà shì jì 聚酰胺-6-薄膜 容量： 保存-20℃ 1毫克
注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。
