公司專注于細胞培養(yǎng)及細胞銷售的細胞生物學技術研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復蘇及凍存細胞及相關技術服務,公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、人小細胞肺癌細胞;NCI-H446
技術培訓、售后服務,其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內外細胞研究機構建系。
細胞名稱 人小細胞肺癌細胞;NCI-H446
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁/懸浮生長,混合
特征特性 該細胞是1982年由Carney D和Gazdar AF等從一位小細胞肺癌患者的胸腔積液中建立的。細胞的原始形態(tài)并不具有小細胞肺癌特征。這個細胞株是小細胞肺癌的生化和形態(tài)學上的變種,表達神經元*的烯醇酶和腦型肌酸激酶同工酶;*脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產素或胃泌激素釋放肽未達到可檢測水平。與正常細胞相比,該細胞c-myc DNA序列擴增約20倍,RNA增加15倍。Z初傳代培養(yǎng)基用含有5%FBS的RPMI1640,另外添加10 nM、0.005 mg/ml胰島素、0.01 mg/ml轉鐵
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質胎牛血清,10%
傳代方法 1:2。3天內可長滿。
傳代情況 P(87+5)
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 B類人小細胞肺癌細胞;NCI-H446
處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞密度達到80%以上或存在成團現象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應的細胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)知識:
1.應如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質良好之細胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經解凍后,為何會發(fā)生細胞數目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現細胞數目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養(yǎng)時出現存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用 錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
GIDRP88 生長抑制和分化相關蛋白抗體H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原
Gas1 生長休止特定蛋白1抗體H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原
MDFIC 肌原調節(jié)抑制蛋白抗體Haase(hyaluronidase) 透明質酸酶/*抗原
MEI-1 減數分裂缺陷蛋白1抗體HA tag HA tag標簽多肽
MTBP/MDM2BP 雙微體2癌基因結合蛋白抗體HA tag(map) HA tag標簽(分支多肽)
NIRF/RNF107 環(huán)指蛋白107抗體HAI-1(Hepatocyte Growth Factor Activator Inhibitor 1) 肝細胞生長因子激活物抑制因子抗原
Necdin 生長抑制蛋白NDN抗體HBA1(hemoglobin alpha 1) 人類血紅蛋白α1抗原
RPRD1A/P15RS 細胞周期依賴性激酶抑制相關蛋白抗體VWCE/URG11(von Willebrand factor C and EGF domain-coaining) 乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗原
PCNP PEST含核蛋白抗體URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation) 乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗原
PLK4/STK18 */*蛋白激酶18URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation)C terminal 肝炎病毒X蛋白(HBxAg)C端抗原
Quiescin Q6/QSOX1 巰基氧化酶1抗體Beta-HCG (Human chorionic gonadotropin Beta) 人beta 亞基人絨毛膜*抗原
LEU5/RFP2 白血病相關蛋白5抗體Alpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha ) 人α亞基人絨毛膜*多肽抗原
SAPK3/MAPK12 應激活化蛋白激酶3抗體(絲裂原活化蛋白激酶12)HCFHrp/BTA(Bladdertumor aigen)human 膀胱腫瘤抗原
SCGB3A1 結合珠蛋白家族3A1抗體CD36L1/SRB1 peptide 高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗原
SEI2/SERTAD2 調控周期蛋白依賴蛋白激酶SEI2抗體HER2 receptor()(erbB-2 isoform 2 receptor N-Terminus) c-erbB-2受體抗體(N端)
SIPA1 信號誘導增殖相關蛋白1抗體HER2 receptor()(erbB-2 isoform 2 receptor N-Terminus) c-erbB-2受體抗原(N端)
AGER 晚期糖基化終末產物特異性受體抗體HGF(hepatocyte growth factor) 肝細胞生長因子抗原
Fast skeletal Myosin/MRLC2 骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人類皰疹病毒8抗原
TFDP3 轉錄因子DP3抗體(肝癌相關抗原661)HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人類皰疹病毒8抗原
BMP1 骨形態(tài)發(fā)生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內切酶抗體HHV8/ORF K2(Human herpesvirus 8 type P) 人類皰疹病毒8抗原
SMARCA2/BRM ATP依賴解旋酶SMARCA2抗體HIF-1 Beta/AR1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta) 缺氧誘導因子1β 抗原
Ferritin Light Chain 鐵蛋白輕鏈抗體HIF-2 Alpha (Hypoxia-inducible factor-2 Alpha) 缺氧誘導因子2α 抗原
CECR5 貓眼綜合征染色體候選基因5抗體Histone H1b(Histone H1.4) 組蛋白H1b抗原
CEE 跨膜結構域邊緣蛋白CEE抗體HDAC1/HD1(histone deacetylase 1) 組織蛋白去乙?;?抗原
CESK1 分子伴侶CESK1蛋白抗體Flag-Tag (CT) Flag Tag標簽多肽
CHCHD2 丙型肝炎NS2反式調節(jié)蛋白/衰老相關的基因10蛋白抗體DYKDDDDK Tag(CT)/Flag-Tag 標簽DYKDDDDK Tag分支肽
CHKL/Ethanolamine kinase beta 乙醇胺激酶β抗體T7 tag(recombina T7-tagged proteins) T7 tag標簽抗原
CHORDC1 含半*和*豐富域蛋白1抗體V5 tag(recombina V5-tagged protein) V5 tag多肽抗原
HIV2 gp36 人類免疫缺陷病毒2型抗體(艾滋病病毒)KT3 tag KT3 tag標簽抗原
phospho-CDK5(Tyr15) 磷酸化周期素依賴性激酶5抗體VSV-G tag(vesicular stomatitis virus glycoprotein) VSV-G tag標簽抗原
MRC2/CD280 巨噬細胞甘露糖受體2抗體HLA-DR(human leukoyte Aigen DR) HLA-DR抗原
Tetranectin/CLEC3B/TNA 四連接素TN抗體HLA-E 人類白細胞抗原E
CLLD8/SETDB2 組蛋白H3-K9甲基轉移酶抗體Ai-HMGA1 (high mobility group AT-hook 1) 高遷移率族蛋白A1抗原
FbxO6 F-box蛋白相關蛋白6抗體HMGA2 (high mobility group A2) 高遷移率族蛋白A2抗原
C3c/Compleme fragme 3c 補體片段C3c抗體HO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1) 血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗原
phospho-PI3 Kinase p110 beta(Ser1070) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)抗體HO-1/HSP32(Hemeo xygenase 1) 血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗原
phospho-PP2A alpha(Tyr307) 磷酸化蛋白磷酸酶2A(PP2Aα)抗體HO-2(Heme oxygenase 2) 血紅素氧合酶-2抗原
phospho-PP2A alpha/beta(Tyr119) 磷酸化蛋白磷酸酶2A(PP2Aα)抗體phospho-HP1/heterochromatin protein 1 (pTyr24)(fruit fly) 異染色質蛋白1(磷酸化多肽)
phospho-eIF4EBP1(Thr36) 磷酸化4E結合蛋白1抗體phospho-heterochromatin protein 1 (pTyr41)peptide 異染色質蛋白1(磷酸化多肽)
phospho-eIF4EBP1/2/3(Thr36) 磷酸化4E結合蛋白1,2,3抗體HPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16) 人類狀瘤病毒16抗原
PI3 Kinase p110 beta 磷脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)抗體HPV18 E6 人類狀瘤病毒18E6
SNX27 SNX27蛋白抗體HPV16-E7/E7 protein(Human papillomavirus type 16) 人類狀瘤病毒16抗原
TRPV4/TRP12 瞬時受體電位蛋白12抗體Hpt/HP(haptoglobin) 結合珠蛋白/觸珠蛋白抗原
TH/T-H glycoprotein TH糖蛋白抗體H-ras/Ras/Ras p21 peptide 原癌基因H-ras抗原
UHRF1 核蛋白95抗體HSTF2/HSF2 peptide 熱休克轉錄因子2抗原
PPP4C */*蛋白磷酸酶4C抗體BCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein) 癌耐藥相關蛋白(抗原)
GNLY/NKG5 顆粒溶素抗體Hrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3) HRAS樣抑制因子3抗原
Tuftsin 促吞噬肽抗體HSP47(Heat shock protein-47) 熱休克蛋白-47抗原