公司專注于細胞培養(yǎng)及細胞銷售的細胞生物學技術研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復蘇及凍存細胞及相關技術服務,公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、人外周血嗜堿性白血病細胞;KU812
技術培訓、售后服務,其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內外細胞研究機構建系。
細胞名稱 人外周血嗜堿性白血病細胞;KU812
形態(tài)特性 骨髓母細胞
生長特性 懸浮生長
特征特性 從一位慢性髓性白血病患者暴發(fā)期的外周血建立了KU812細胞株。 這些細胞至少有一個Ph1(費城)染色體。 這株細胞有一些嗜堿性細胞的標記(如Fc 受體,堿性顆粒,生成組胺),而淋巴標記陰性。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質胎牛血清,10%
傳代方法 1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類人外周血嗜堿性白血病細胞;KU812
處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞密度達到80%以上或存在成團現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應的細胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)知識:
1.應如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質良好之細胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用 錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
BCAT1 胞漿支鏈氨基酸酸轉氨酶抗體NPY2R(Neuropeptide Y Receptor Type 2) 神經肽Y受體2(多肽)
BMP5 骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體NPY1R (neuropeptide Y1 receptor) 神經肽Y1受體抗原
Hepatic lipase 肝脂酶抗體NQO1(NAD(P)H:quinone oxidoreductase l) 醌氧化還原酶抗原
GABA Transporter 1/GAT-1 γ氨基丁酸運載蛋白1抗體NR1/NMDAR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1) *受體1(多肽)
PAPPA 相關血漿蛋白A抗體NR1/NMDAR1/GLUR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1) *受體1抗原
PPT1 棕櫚酰蛋白硫酯酶1抗體NR1/NMDAR1 *受體1
CRHR2 促腎上腺皮質釋放激素受體2抗體NR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C) *受體2C(多肽)
CHX10 CHX10蛋白抗體N-ras 原癌基因抗原
Glycophorin C/CD236 糖蛋白C抗體Nrf2 peptide 核因子2相關因子2抗原
Frizzled 2 W信號受體FZD2蛋白抗體NRF-1(nuclear respiratory factor-1) 核呼吸因子-1抗原
IHH HHG2抗體NSE (neuron specific enolase) 神經元特異性烯醇化酶抗原
Insig2 胰島素誘導基因2抗體CP(Na+/taurocholate Cotransporting Polypeptide) 鈉離子/牛磺膽酸共轉運蛋白抗原
MCHR/GPR24 G蛋白偶聯(lián)受體24抗體Ghrelin 28 腦腸肽28
PSMC1/Proteasome 19S S4 26S蛋白酶調節(jié)亞型抗體OCLN(Occluding) 咬合蛋白抗原
ZDHHC17/HIP14 NFκB激活蛋白205抗體Oct-4(Octamer-4) 胚胎干細胞關鍵蛋白抗原
FANK1 HSD13蛋白抗體ODC(Ornithine decarboxylase) *脫羧酶抗原
Destrin 19/ADF 肌動蛋白解聚因子19抗體ompF(putative outer membrane porin F protein) 小腸結腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗原
Neurotensin/S 神經緊張素抗體OLFM1 peptide 嗅球蛋白1多肽抗原
NESG1/CCDC19 鼻咽上皮細胞特異性蛋白1抗體ORX-A(orexin-A) 增食欲素-A/欲激素A抗原
FOXL2 小瞼裂綜合征蛋白BPES抗體OTR(oxytocin receptor) *受體
XPC DNA補充修復XPC細胞蛋白抗體OXR (Orexin receptor) 食欲素受體(多肽)
EPHA10 *蛋白激酶受體A10抗體P2P-R/RBBP6(proliferation poteial protein related) 增殖潛能相關蛋白抗原
TP53I8/EI24 腫瘤蛋白p53誘導蛋白8P19ARF p19ARF抑癌基因抗原
EVC2 膜蛋白EVC2抗體phospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182) peptide 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶p38抗原
BMPR1B 骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體1B抗體MKK3(MAP Kinase Kinase 3) 絲裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗原
Vinculin 粘著斑蛋白抗體P53(wt-p53) 腫瘤抑制基因抗原(野生型P53)
DNA Ligase 1 DNA連接酶1抗體Mtp53(Muta type p53) 突變型P53抗原
FOXC1/FREAC3 叉頭相關轉錄因子3抗體WIG-1(wtp53-induced gene 1) 野生型p53誘導基因1抗原
SCYL1BP1 SCYL結合蛋白1抗體P73 protein P73腫瘤抑制基因抗原
Gephyrin 橋尾蛋白抗體p70 S6 Kinase/P70 Beta1 p70S6Kb抗原
W7A 原癌基因w7a蛋白抗體PALB2(partner and locaizer of BRCA2) 癌易感基因相關蛋白2
BLK/MODY11 B淋巴細胞*激酶抗體PAFR/PTAFR 血小板活化因子受體抗原
COG1 COG1蛋白抗體Phospho-PAK4 (Ser99) peptide 磷酸化p21激活激酶4多肽抗原
BAP31 BAP31蛋白抗體PAK7/PAK5/MBT 激活激酶PAK7/PAK5抗原
ADORA1/Adenosine A1 Receptor 腺苷A1受體抗體PAR-1 (Protease-activated receptors-1) 蛋白酶激活受體-1抗原