公司專注于細胞培養(yǎng)及細胞銷售的細胞生物學技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復(fù)蘇及凍存細胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、人肝母細胞瘤細胞;HuH-6
技術(shù)培訓(xùn)、售后服務(wù),其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內(nèi)外細胞研究機構(gòu)建系。
細胞名稱 人肝母細胞瘤細胞;HuH-6
形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 據(jù)報道產(chǎn)球蛋白和甲胎蛋白。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。6-7天長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:8,12;D16S539:10,11;D18S51:13,21;D19S433:12,12.2;D21S11:29,30;D2S1338:18;D3S1358:14,17;D5S818:8,11;D7S820:11,12;D8S1179:10,11;FGA:19,24;TH01:7,8;TPOX:8;vWA:14,17
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類人肝母細胞瘤細胞;HuH-6
處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞密度達到80%以上或存在成團現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)知識:
1.應(yīng)如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
MAGEC1 黑色素瘤相關(guān)抗原C1抗體WWOX (WW domain-coaining oxidoreductase) 包含氧化還原酶的WW域抗原
MAGEE1/MAGEC2 黑色素瘤相關(guān)抗原C2抗體XIAP(X-linked Inhibitor of Apoptosis Protein) X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗原
MAGEL2 黑色素瘤抗原樣基因2抗體XAF1(XIAP-associated factor 1) XIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白抗原
MGEA5 組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶抗體(腦膜瘤表達抗原5)XRCC1(X-ray Repair Cross Complemeing 1) X射線修復(fù)交叉互補蛋白/細胞堿基切除修復(fù)基因抗原
MAGEG1/HCA4/NDNL2 黑色素瘤相關(guān)抗原G1抗體(肝癌相關(guān)蛋白4)ZO-1 peptide 胞質(zhì)緊密粘連蛋白1抗原
FAIM2 FAS凋亡抑制分子2Ag-ARC(ARG3.1/ARC, Activity-regulated cytoskeleton-associated protein) ARC(多肽抗原)
Glutaredoxin 1 谷氧還蛋白/巰基轉(zhuǎn)移酶抗體Angiotensin II receptor(Ang II ) 血管緊張素Ⅱ受體(抗原)
PDCD6/ALG2 凋亡相關(guān)蛋白6抗體Akt/PKC(Protein Kinase C,PKC) 蛋白激酶C(多肽抗原)
PDCD7 凋亡相關(guān)蛋白7抗體Beta1-adrenergic receptor 腎上腺素能受體β1(抗原)
UBE1/E1 Ubiquitin Activating Enzyme 泛素激活酶E1抗體Annexin V 膜粘連蛋白-5(抗原)
GAS2L1 生長停滯特異性蛋白2家族1抗體AQP4(aquaporin Protein-4) 水通道蛋白-4(抗原)
GAS2L3 生長停滯特異性蛋白2家族3抗體B7-H4 B7-H4(抗原)
GilZ/TilZ 糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)*拉鏈蛋白抗體BADH2 (Betaine-aldehyde dehydrogenase ) BADH2抗原
MIER2 中胚層誘導(dǎo)早期反應(yīng)蛋白2抗體BGP(Bone Gla-protein) 骨鈣素(抗原)
IEX1/Differeiation depende gene 2 protein 分化相關(guān)基因2蛋白/立即早期反應(yīng)蛋白抗體BK channel (stretch-activated Kca channel) BK通道蛋白(抗原)
IL-4I1 白細胞介素4誘導(dǎo)蛋白1抗體BKCa channels(calcium-activated potassium channel) 鈣激活鉀通道蛋白
JMJD6 凋亡細胞清除受體抗體BTG2/TIS21(B-cell translocation gene 2) BTG2(抗原)
MAGED1 黑色素瘤相關(guān)抗原D1抗體C-fos(i mmediate early gene, ieg) 即刻早期基因(是一種原癌基因)抗原
MAL T淋巴細胞成熟相關(guān)蛋白抗體C-jun/AP-1 (Oncoprotein C-jun:active protein 1) 原癌基因蛋白(活化蛋白1)(抗原)
NOX5 還原型輔酶Ⅱ氧化酶5/*腺嘌呤二核苷酸磷酸抗體cyclin D1 周期素D1(抗原)
Nucleostemin 核干細胞因子抗體(*核苷酸結(jié)合蛋白3)Beta-casein( Beta-casein) β-酪蛋白(抗原)
PDCD10 凋亡相關(guān)蛋白10抗體CCK8 (Cholecystokinin-8) 膽囊收縮素/縮膽囊素(八肽)
Fascin/Actin bundling protein 肌動蛋白結(jié)合蛋白Fascin抗體CD3 epsilon peptide CD3 epsilon(抗原)
SLPI/ALK1 分泌型白細胞蛋白酶抑制因子抗體CD4 CD4(抗原)
TPST1 酪蛋白硫酸轉(zhuǎn)移酶1抗體CD4(Rabbit Ai-Human Mouse rat CD4 Palyclonal Ai-body) CD4抗原
TPST2 酪蛋白硫酸轉(zhuǎn)移酶2抗體CD8 CD8抗原
AGPA/Alpha 1 Acid Glycoprotein α1酸性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體CD20(抗原) CD20(抗原)
PIWIL4 piwi樣4蛋白抗體CD25/IL-2RA(Imterleukm-2 Receptor alpha) CD25/白介素2-受體(抗原)
CARD7/NALP1 凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體CD31(PECAM-1) 血小板內(nèi)皮細胞黏附分子-1(抗原)
NALP4 癌/抗原58抗體CD34 CD34(多肽抗原)
NLRP10 富含*重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體CD56/NCAM1 (Neural Cell Adhesion Molecule 1) 神經(jīng)細胞粘附分子1(抗原)
beta COP β衣被蛋白抗體CEAcam8/CD67 癌胚抗原相關(guān)細胞粘附分子8
Caspase 4/Caspase 11 半胱胺酸蛋白酶4/11抗體CD68 CD68抗原
Caspase 14 半胱胺酸蛋白酶蛋白14抗體CD68 CD68(多肽抗原)
Caspase 5 半胱胺酸蛋白酶蛋白5抗體CD117/c-kit/SCFR 干細胞生長因子受體/細胞表面分化抗原(抗原)
FEM1A 前列腺素E受體4相關(guān)蛋白抗體CD133 造血干細胞抗原(多肽抗原)
LANPL 富含*樣酸性核蛋白抗體CD147/EMMPRIN(Extracellular matrix metalloproteinase inducer) CD147(抗原)