公司專注于細胞培養(yǎng)及細胞銷售的細胞生物學技術研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復蘇及凍存細胞及相關技術服務,公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、大鼠腹水癌細胞;Walker/LLC-WRC 256技術培訓、售后服務,其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內外細胞研究機構建系。
細胞名稱 大鼠腹水癌細胞;Walker/LLC-WRC 256
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 Walker 256是一株大鼠腹水癌細胞系。該細胞注入大鼠腹腔能快速形成腹水瘤,是研究抗腫瘤藥物體內模型的*材料。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C180
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權限 A類
大鼠腹水癌細胞;Walker/LLC-WRC 256處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞密度達到80%以上或存在成團現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應的細胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)知識:
1.應如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質良好之細胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用 錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
鄰甲酚磺酜酞
〖號〗:1733-12-6
C21H18O5S=382.43
〖級別〗:IND
pH變色域:6.5(黃)~8.5(紫)
大吸收波長λ1(pH 6.5):432~436 nm
大吸收波長λ1(pH 8.5):571~574 nm
質量吸收系數(shù)α1(λ1,pH 6.5,干樣):49.0~67.0L/cm·g
質量吸收系數(shù)α2(λ2,pH 8.5,干樣):100.0~132.0L/cm·g
〖干燥失重〗:≤3.0%
〖灼燒殘渣〗(以〖硫酸鹽〗計):≤0.2%
乙醇溶解試驗:合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:紅棕色結晶性粉末。溶于乙醇、水、稀酸(黃色)和稀堿(紫色)。其0.1%乙醇溶液或0.04%鈉鹽水溶液用作指示劑
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)酸堿指示劑,pH 7.2(黃)~8.8(紫紅); pH 2.0(橙色)~3.0(琥珀色)。
〖保存〗:RT
甲酚紅鈉鹽
〖英文名稱〗:Cresol Red sodium salt;o-Cresolsulfonphthalein sodium salt
〖其他名稱〗:鄰甲酚磺酰酞鈉鹽;鄰甲酚紅鈉鹽
〖號〗:62625-29-0
C21H17NaO5S=404.41
〖級別〗:IND
純度:≥95.0%
pH變色域:7.2(黃)~8.8(紅);1.8(橙)~2.0(黃)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:褐色或紅棕色結晶粉末,溶于水,微溶于乙酸、乙醇。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗:RT,保質期5年
石蕊
〖英文名稱〗:Litmus;Tournesol;Turnsole;Laccamusica
大鼠腹水癌細胞;Walker/LLC-WRC 256〖其他名稱〗:石蕊指示劑
〖號〗:1393-92-6
相對分子質量:~3300
〖級別〗:IND
分光光度試驗:合格