*代謝物（AOZ）檢測試劑盒說明書

一、*代謝物檢測試劑盒概要

硝基呋喃類藥物因有非常好的抗菌作用和藥動力學的特性，曾經(jīng)被廣泛應用，作為禽類、水產(chǎn)和豬促生長的添加劑。但在長時間的實驗研究過程中發(fā)現(xiàn)，硝基呋喃類藥物和代謝物均可以使實驗動物發(fā)生癌變和基因突變，正因為如此才導致此類藥物禁止在治療和飼料中使用。

由于硝基呋喃類藥物在體內很快就能被代謝，而在組織中結合的代謝產(chǎn)物則能存留較長的一段時間，所以在分析此類藥物的殘留時經(jīng)常要分析其代謝后的產(chǎn)物，管理部門就以檢測代謝產(chǎn)物為手段達到檢測硝基呋喃類殘留的目的。

用來檢測*代謝物的zui常用方法是LC-UV，LC-MS和LC-MS/MS。酶聯(lián)免疫方法結合了色譜技術，采用AOZ衍生物的特異性抗體，具有很高的精確度和靈敏度，較低的操作技術要求和短暫的檢測時間，檢測樣本量大等特點在檢測中很好的表現(xiàn)出來。

二、試驗原理

*代謝物檢測試劑盒采用間接競爭一步法。在酶標板中同時加入校準品（或樣本）、酶結合物及抗體，酶標板上包被的抗原與加入的校準品（或樣本）中的抗原競爭結合加入的抗體，同時酶結合物與抗體結合。用 TMB 底物顯色，樣本吸光值與其殘留物*濃度呈負相關，與校準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數(shù)，即可得出樣本中*的含量。

三、適用范圍

可定性、定量檢測動物組織（雞、豬、魚、蝦等）中*代謝物的殘留量。

四、交叉反應率

*代謝物…………………………………………

*代謝物…………………………………小于0.1%

呋喃它酮代謝物…………………………………小于0.1%

*代謝物…………………………………小于0.1%

*………………………………………………小于1%

呋喃它酮………………………………………………小于1%

*………………………………………………小于1%

五、檢測方法靈敏度、準確度、精密度

試劑盒靈敏度：0.05ppb

樣本zui低檢測限：

組織樣品檢測下限……………………………………0.1ppb

準確度：

水產(chǎn)、肌肉、肝臟組織 …………………………… 80~120%        

精密度：

的變異系數(shù)均小于10%

六、注意事項

1、室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫（20-25℃）會導致所有標準的OD值偏低。

2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會出現(xiàn)標準曲線不成線性，重復性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。

3、每加一種試劑前需要將其搖勻。

4、反應終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。

5、不要使用過了有效日期的試劑盒；也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑，摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低；不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。

6、儲存條件

保存試劑盒于2-8℃，不要冷凍，將不用的微孔板放進自封袋重新密封。標準物質和無色的發(fā)色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。

7、試劑變質的跡象

發(fā)色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質，應當棄之。0標準的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5 ）時，表示試劑可能變質。

8、在加入底物A液和底物B液后，一般顯色15min即可。若顏色較淺，可延長反應時間到20min（或更長），但不得超過30min。反之，則減短反應時間。

七、貯藏條件及保存期

    貯藏條件：保存試劑盒于2~8℃。

    保存期：該產(chǎn)品有效期為12個月。