保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
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產(chǎn)品名稱 | 用途 | 貨號 |
糞腸球菌(糞鏈球菌) | 僅供科研 | GOY-01J6430 |
菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
乙?;M蛋白H2B抗體Human SLC38A1 ELISA Kit脯
乙?;M蛋白H2B抗體Human SLC25A34 ELISA Kit木犀草苷
化組蛋白H2AX抗體Human SLC25A33 ELISA Kit款冬酮
化熱休克蛋白27抗體Human SLC25A45 ELISA Kit獨活
化熱休克蛋白70抗體Human ATP6AP2(Renin receptor) ELISA Kit乳香
化熱休克因子1抗體Human SLC27A2 ELISA Kit徐長卿
化熱休克因子1抗體Human SLC25A46 ELISA Kit煙酰
化熱休克蛋白70抗體Human SLC27A3 ELISA Kit
糞腸球菌(糞鏈球菌)反式 GR,99.0%(劇品)豬血漿激肽釋放(KLKB1)免疫試劑盒血管生成素相關蛋白6抗體YY1AP1/HCCA2 肝癌相關蛋白2抗體(轉(zhuǎn)錄因子YY1結(jié)合蛋白1抗體)
正丁 >99.5%(GC)豬血紅蛋白(Hb)免疫試劑盒Muellerian繆勒管激素抑制因子抗體YY1 核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子YY1抗體
正丁 ACS, ≥99.4%豬血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)免疫試劑盒酪氨蛋白激受體A8抗體YES1 原癌因酪氨蛋白激Yes1抗體
乙丁酯 for HPLC, ≥99.7% (GC)豬血管舒緩激肽(BK)免疫試劑盒脂肪酰輔A家族成員1抗體YBX-1/YB1 核敏感元件結(jié)合蛋白1
乙乙酯 AR,99%豬血管生成素2(ANG-2)免疫試劑盒芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣2抗體YB1 y-盒結(jié)合蛋白1抗體
乙乙酯 for HPLC, >99.0%(GC)豬血管生成素1(ANG-1)免疫試劑盒化芳香N-乙?;D(zhuǎn)移抗體YAP1 原癌因Yes相關蛋白1抗體
溶液 AR,含10-15% 穩(wěn)定劑豬血管內(nèi)皮粘附分子1(VCAM-1)免疫試劑盒肌動蛋白結(jié)合蛋白1抗體XTP4 乙型肝炎病X蛋白反轉(zhuǎn)錄蛋白4抗體
Standard for GC,>99.9%豬血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)免疫試劑盒粘附分子IgG樣結(jié)構域蛋白2抗體XRCC4 X射線修復交叉互補蛋白4抗體
AR,99.5%豬血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復合體(VE-cad)免疫試劑盒肌動蛋白結(jié)合蛋白DOC6抗體XRCC3 X射線修復交叉互補蛋白3抗體
CP,99.5%豬血管緊張素轉(zhuǎn)化2(ACE2)免疫試劑盒AFG3樣蛋白2/脊髓小腦共濟失調(diào)蛋白28抗體XRCC1 X射線修復交叉互補蛋白抗體
AR,無水級豬血管緊張素轉(zhuǎn)化(ACE)免疫試劑盒激活素受體相互作用蛋白1抗體XPC DNA補充修復XPC蛋白抗體
for HPLC, ≥99.9%豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒固酮類還原家族7成員A2抗體XPB/ERCC3 DNA損傷修復ERCC3蛋白抗體
農(nóng)殘級, ≥99.9%豬血管活性腸肽(VIP)免疫試劑盒蛋白激AKT1,2,3抗體XKR1 膜轉(zhuǎn)運蛋白XK抗體
≥99.9%(GC)豬旋毛蟲IgG抗體免疫試劑盒帕金森病相關蛋白ATP13A2抗體XIAP/BIRC4 X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗體
ACS豬β4(Thymosin β4)免疫試劑盒肌側(cè)索硬化蛋白2抗體XDH/Xanthine Oxidase 氧化抗體