異檸檬酸裂解酶（ICL)微量法檢測(cè)試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品：石蠟切組織線粒體DNA分離試劑盒 50次
口腔粘膜細(xì)胞基因組DNA純化試劑盒 50次
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土壤DNA分離試劑盒 50次
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土壤DNA分離+高質(zhì)純化試劑盒 20/50次
土壤細(xì)DNA分離試劑盒 50
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產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6597 |
商品介紹
測(cè)定意義 ICL（EC4.1.3.1）主要存在于植物和微生物中，油料作物種子在萌發(fā)過(guò)程中，通過(guò)乙醛酸循環(huán)及其他過(guò)程將脂肪轉(zhuǎn)變成碳水化合物。ICL是乙醛酸循環(huán)的關(guān)鍵酶之一。 測(cè)定原理： ICL催化異檸檬酸降解為乙醛酸和琥珀酸，乙醛酸和NADH在LDH的作用下生成乙醇和NAD，NADH在340nm下有特征吸收峰，監(jiān)測(cè)340nm吸光度的減小速率可間接反應(yīng)ICL活性。 需自備的儀器和用品： 紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水 |
試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；
試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
所需的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測(cè)定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本：
取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測(cè)液。
【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本：
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；
12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10
4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測(cè)；若渾濁，離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1，建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用（10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管，對(duì)照管數(shù)值在什么范圍？對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是（1）試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用；
（2)沒(méi)有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長(zhǎng)到 40min）。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè)，通常可以使測(cè)定正常。
Bensingtonia sp.激活T-核因子1檢測(cè)試劑盒
Bullera sp.激活素A檢測(cè)試劑盒
Bullera sp.敏感性脂肪檢測(cè)試劑盒
Derxomyces simaoensis激肽釋放1檢測(cè)試劑盒
Candida sp.低密度脂蛋白檢測(cè)試劑盒
Pseudozyma sp.低密度脂蛋白膽固檢測(cè)試劑盒
Bullera mrakii己糖激檢測(cè)試劑盒
Bullera sp.己糖激2檢測(cè)試劑盒
異檸檬酸裂解酶（ICL)微量法檢測(cè)試劑盒月桂 ≥98%, FCC, FG大鼠皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒GA結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄因子α/GABP-α抗體IKBKE/IKKi 核因子κB抑制蛋白E抗體
月桂 GR，99%大鼠牛血清白蛋白(BSA)抗體(IgG)免疫試劑盒GA結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄因子β/GABP-β1/GABP-β2抗體IKB zeta/MAIL protein KB抑制蛋白激Ζ抗體
月桂 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC)大鼠XIV(FXIV/protein C)免疫試劑盒谷氨脫羧65+谷氨脫羧67抗體IKAROS 鋅指蛋白IKAROS抗體
月桂 CP，97%大鼠IX(FIX)免疫試劑盒谷氨脫羧樣蛋白1抗體IHH HHG2抗體
月桂 standard for GC, ≥99.5% (GC)大鼠Ⅻ(FⅫ)免疫試劑盒葡萄糖-6-3/G6Pase-β抗體IGSF9 疫球蛋白超家族成員9抗體
月桂 AR，98%大鼠ⅩⅢ(FⅩⅢ)免疫試劑盒α葡萄糖苷/溶體α-葡糖苷抗體IGSF8/CD316 免疫球蛋超家族成員8抗體
肉豆蔻酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.5% (GC)大鼠Ⅹ(FⅩ)免疫試劑盒生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)蛋白3抗體IGSF6 免疫球蛋白超家族成員6抗體
肉豆蔻酯 ≥98%大鼠Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)蛋白4抗體IGSF5 免疫球蛋白超家族成員5抗體
肉豆蔻酯 98%大鼠原片段F1+2(F1+2)免疫試劑盒G氨丁受體pi/GABAA Rπ抗體IGSF3 免疫球蛋白超家族成員3抗體
十四 98%大鼠受體(TR)免疫試劑盒化G氨丁B型受體2抗體IGSF21 免疫球蛋白超家族成員21抗體
棕櫚酯 97%大鼠抗復(fù)合物(TAT)免疫試劑盒G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合蛋白α11/Gα 11 抗體IGSF2/CD101 CD101抗體
棕櫚酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.0% (GC)大鼠抗Ⅲ復(fù)合物(TAT-III)免疫試劑盒G3BP2蛋白抗體IGSF16/CD300C 免疫球蛋白超家族成員16抗體
棕櫚酯 standard for GC，≥98.0% (GC)大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)免疫試劑盒γ氨丁運(yùn)載蛋白2抗體IGSF12/CD300 免疫球蛋白超家族成員12抗體
棕櫚酯 99%（GC)大鼠凝聚素(CLU)免疫試劑盒β1-6 N-乙酰氨葡萄糖轉(zhuǎn)移3抗體IGSF11 大腦和特異性免疫球蛋白超家族成員11抗體
壬酚聚氧乙烯(NP 40) ~10% in H2O大鼠檸檬合(CS)免疫試劑盒β1-6 N-乙酰氨葡萄糖轉(zhuǎn)移7抗體IGSF10 免疫球蛋白超家族成員10抗體
測(cè)定步驟：
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋：將試劑三用蒸餾水稀釋50倍，用多少配多少。（試劑三和蒸餾水1：49稀釋。
3、 工作液配制：在試劑一加入100μl試劑二，充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。（若一次性測(cè)定樣本較少，可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml：0.1ml的比例混勻配制）
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解（溶解后一周內(nèi)用完）。
5、 樣本測(cè)定（在96孔板中依次加入下列試劑）
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
