實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100µL，37°C孵育1小時(shí)；
3. 吸棄，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時(shí)；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。
公司采用的全是進(jìn)口原材料研，發(fā)靈敏性高，高效性，*抗體，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強(qiáng)，無效包退包換，公司提供免費(fèi)代測服務(wù)，各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全，質(zhì)量可靠。
產(chǎn)品名稱 | NB-Ab elisa試劑盒規(guī)格 |
英文名稱 | NB-Ab elisa Kit |
貨號(hào) | GOY-H7274 |
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樣品收集、處理及保存：
1）.細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2）細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3）血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4）血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5）體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.）組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測程序：
1. 加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測吸光值。
氨芬酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)HER4/ErbB4 (111B2) Rabbit mAb2-氟-6-甲氧基
地塞米松環(huán)氧水解物HER4/ErbB4 (111B2) Rabbit mAbN-基馬來酰亞
2,6-二叔丁基對(duì)甲酚,丁基羥, 抗氧劑 BHT Clathrin Heavy Chain (D3C6) XP® Rabbit mAb硝酸釓
甲基潑尼松Clathrin Heavy Chain (D3C6) XP® Rabbit mAb甲基酸頻哪酯
甲基潑尼松(標(biāo)準(zhǔn)品)TNFRSF17/BCMA Antibody對(duì)叔丁基酮
阿普斯特;CC10004RalA (D6G8) Rabbit mAbS-基丁氨酸
L-(-)-葡萄糖(標(biāo)準(zhǔn)品)RIP3 (D4G2A) Rabbit mAb (PE Conjuga)2-溴-5-氟甲
7-酮基去氫表雄酮SMC1 Antibody2-氟-甲氧基
硝酸銣Phospho-S6 Ribosomal Proin (Ser235/236) (D57.2.2E) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)鄰三氟甲氧基甲
CHIR-99021 (CT99021.HCl)SQSTM1/p62-like Receptor Antibody Sampler Kit鄰氨基
-3,5-二甲酚,對(duì)間二甲酚DCBLD2 AntibodyFmoc-2-氨基異丁酸
駱駝蓬;駱駝蓬靈;哈梅靈(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-SMC1 (Ser957) (5D11G5) Mouse mAb2-基吲哚
阿卡地新(AICAR)Phospho-NF-κB p105 (Ser933) (18E6) Rabbit mAb吉西他濱
蒲公英萜；蒲公英賽(標(biāo)準(zhǔn)品)Stat5a (4H1) Mouse mAb并噻吩
琥珀酸普卡必利Phospho-NF-κB p105 (Ser933) (178F3) Rabbit mAb (IHC Specific)5-硝基
鹽酸納洛酮Phospho-NF-κB2 p100 (Ser866/870) Antibody3,4,5-*氧基
硝酸布康唑Phospho-NF-κB2 p100 (Ser866/870) Antibody[1,1'-雙(二基膦)二茂鐵]二化鈀二絡(luò)合物
NVP-BKM120Phospho-NF-κB2 p100 (Ser866/870) Antibody2-氟甲
NB-Ab elisa試劑盒規(guī)格胰酶大豆瓊脂 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
大豆卵磷脂 (常規(guī)) 訂購|咨詢 規(guī)格： 1g
大豆卵磷脂 (超純級(jí)) 70-18-8 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
麥康凱瓊脂 478-43-3 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
水解乳蛋白 6078-17-7 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
Hanks'平衡鹽 526-07-8 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
DMEM (低糖, 含酚紅) 78804-17-8 訂購|咨詢 規(guī)格： 10mg
DMEM (高糖, 含酚紅) 604-80-8 訂購|咨詢 規(guī)格： 10mg
DMEM/F-12 價(jià)格基 訂購|咨詢 規(guī)格： 1g
酪蛋白胨 479-41-4 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
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酶水解酪蛋 474-58-8 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
酪蛋白 訂購|咨詢 規(guī)格： 1g
酸水解酪蛋白 訂購|咨詢 規(guī)格： 10mg
腦心浸液 訂購|咨詢 規(guī)格： 50mg
操作步驟：
1）運(yùn)用前，將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫，防止加樣時(shí)參加很多的氣泡，發(fā)生加樣上的差錯(cuò)。
2）依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自個(gè)的數(shù)量來定，能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3）參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育1小時(shí)。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
5）每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
7）每孔參加底物A、B各50ul，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。
8）取出酶標(biāo)板，敏捷參加50ul停止液，參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測定成果。
9）在450nm波利益測定各孔的OD值。
