細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對象是活細(xì)胞

在實(shí)驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗對象。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    結(jié)腸癌細(xì)胞：HCT 116 

別稱HCT-116; HCT.116; HCT_116; HCT116; CoCL2

種屬人類

年齡（性別）男性，48歲

組織來源結(jié)直腸癌

生長特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

背景描述HCT 116細(xì)胞是由M·Brattain等人于1979年從患結(jié)腸癌的男性病人中分離的三株惡性細(xì)胞中的一株。HCT 116細(xì)胞在半固體瓊脂糖培養(yǎng)基中形成克?。籋CT 116細(xì)胞在無胸腺裸鼠有致瘤性，形成腫瘤結(jié)節(jié)。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基McCoy’s 5A＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

倍增時間~25-48小時

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性Yes, in nude mice.

基因表達(dá)情況carcinoembryonic antigen (CEA) 1 ng per 1×10^6 cells per 10 days.

處理方法：

收到細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細(xì)胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代。

實(shí)驗操作步驟：  

a．采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項：

1. 正式實(shí)驗前請選取幾個樣本做預(yù)實(shí)驗，以優(yōu)化實(shí)驗條件，取得最佳實(shí)驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實(shí)驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

狗 ANGPTL7 基因全長ORF克隆

狗 BDNF 基因全長ORF克隆

大鼠 CD151 基因全長ORF克隆

大鼠 MGAT3 基因全長ORF克隆

大鼠 ITGAL 基因全長ORF克隆

大鼠 PDGFRA 基因全長ORF克隆

大鼠 SPN 基因全長ORF克隆

大鼠 LAYN 基因全長ORF克隆

大鼠 CIDEA 基因全長ORF克隆

大鼠 HGF 基因全長ORF克隆

結(jié)腸癌細(xì)胞：HCT 116 100mL Phosphatase Buffer-1,2X  Phosphatase Buffer-1,2X  常溫保存

4次 大提柱式真菌DNAout Maxi Column Fungal DNAOUT 常溫（RNase A需要放-20℃保存）

2 ug pRSV-rev pRSV-rev 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

50T 禽呼腸孤病毒PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

10mL 溶液,25mg/mL Chloramphenicol Solution -20℃避光保存

2 ug pET-27b(+) pET-27b(+) 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

25g 蒽酮 Anthrone 室溫保存

Rabbit anti-MG IgG/Cy3  Cy3標(biāo)記的兔抗爪沙鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlMOS  原基因/蛋白激MOS抗體 規(guī)格: 0.2ml

100mL AMPD Buffer，0.2M，pH7.5  AMPD Buffer，0.2M，pH7.5  常溫保存

Rabbit Anti-Mink IgG/HRP  辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗水貂IgG 規(guī)格: 0.1ml

Goat Anti-Bovine IgG/Cy5  Cy5標(biāo)記的羊抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml

RPA32/RPA2  復(fù)制因子A蛋白2 規(guī)格: 0.2mlHistone H3-like protein  組蛋白H3樣蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml