微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
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產(chǎn)品名稱 | 用途 | 貨號 |
耐久腸球菌(堅(jiān)韌鏈球菌) | 僅供科研 | GOY-01J6491
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菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達(dá)10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護(hù)劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
FSH 禽類聯(lián)ELISA試劑盒Anti-L1CAM Antibody小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)elisa定量檢測試劑盒
LH 禽類聯(lián)ELISA試劑盒Anti-LAIR2 Antibody小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)elisa定量檢測試劑盒
PRL 禽類聯(lián)ELISA試劑盒Anti-LAMA4 Antibody小鼠肝核因子1α(HNF1a)elisa定量檢測試劑盒
魚雌二Anti-LAMA5 Antibody小鼠白介素18結(jié)合蛋白(IL18BP)elisa定量檢測試劑盒
大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白Anti-LAMA1 Antibody小鼠糖原合成激3α(GSK3a)elisa定量檢測試劑盒
兔子腫瘤壞死因子αAnti-LAMB1 Antibody小鼠L苯解氨(PAL)elisa定量檢測試劑盒
小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體Anti-LAMB2 Antibody小鼠基質(zhì)金屬蛋白3(MMP-3)elisa定量檢測試劑盒
人胸腎表達(dá)趨化因子Anti-LAMB3 Antibody小鼠IgG Fc片段(IgG-Fc)elisa定量檢測試劑盒
耐久腸球菌(堅(jiān)韌鏈球菌)1,1'-聯(lián)萘酚-2,2'-雙(三氟磺酯) 98%Anti-SLC24A5 可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC24A5抗體小鼠普通轉(zhuǎn)錄因子IIH多肽1(GTF2H1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
二膦 95%Anti-Slc26a5 Slc26a5抗體小鼠饑餓素(GHRL)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
(R)-(-)-5,5'-雙[二(3,5-二叔丁-4-氧)]-4,4'-二-1,3Anti-SLC6A19 依賴鈉鈣交換蛋白6小鼠神經(jīng)膠質(zhì)成熟因子β(GMFB)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
(S)-DTBM-SEGPHOS 98%Anti-SLC16A3/MCT-4 MCT4抗體小鼠膠質(zhì)系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
1H-咪唑-4- 98%Anti-Smac/DIABLO 線粒體促凋亡蛋白抗體小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
三氟磺酐 98%Anti-SLC33A1 乙酰輔A轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體小鼠胰高血糖素(GC)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
3-溴 98%Anti-SLC34A2 鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體小鼠糖皮質(zhì)類固受體(GR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
并-15-冠-5 98%Anti-SMN1 運(yùn)動神經(jīng)元生存蛋白1抗體小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GRα)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
鄰二酚-O,O′-二乙 97%Anti-Slit2/Slil3 神經(jīng)遷移蛋白Slit2/3抗體小鼠糖皮質(zhì)激素受體β(GRβ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
1-(3-氨)吡咯烷 97%Anti-SLT/SLT-IIe/O139 豬水腫素(O139)菌體蛋白抗體小鼠葡萄糖激(GCK)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
2-氧溴乙烷 98%Anti-SLC39A6 SLC39A6抗體小鼠糖蛋白130(gp130)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
代異丁烷 98%Anti-Slug 鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體小鼠葡萄糖-6-脫氫(G6PD)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
代正烷 99%Anti-SLC40A1/FPN1 膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC40A1抗體小鼠葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(GLUT2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
代正烷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8% (GC)Anti-SLC44A1/CD92 溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族44成員1抗體小鼠葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
代仲丁烷 99%Anti-Smad1 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體小鼠葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(GLUT4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒