公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
產(chǎn)品介紹:
Bst 4.0 DNA/RNA聚合酶(32U/ul)無甘油
Bst 4.0 DNA/RNA Polymerase 為Bst 3.0 DNA 聚合酶和極其耐熱的ThermoStable V RTase反轉(zhuǎn)錄酶(耐受65°C)的混合品,該酶適合于RNA的LAMP 反應(yīng)。與Bst 3.0DNA/RNA聚合酶相比,其反轉(zhuǎn)錄活性提高了近100倍,可以檢測低靈敏度的RNA分子。該酶在以RNA為模板的LAMP實(shí)驗(yàn)中,做為推薦用酶,其擴(kuò)增能力高于Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶。除此外,該酶同樣可以進(jìn)行DNA模板的LAMP擴(kuò)增。
酶含量:
1 μl的Bst 4.0 DNA/RNA Polymerase中包含32 U的Bst 3.0DNA Polymerase 和 80U 的 ThermoStable V RTase。
該酶制品中不含有甘油,可用于建立凍干體系。
儲(chǔ)存:-20℃ 可保存 3 年。
典型的 LAMP 反應(yīng)
1. 按以下組分配制 LAMP 反應(yīng)液
Bst 4.0 DNA/RNA Polymerase (32 U/μl) 0.05~0.25 μl
10×Isothermo Buffer(Mg2+ free) 2.5 μl
100 mM Mg2+
X μl
dNTP Mixture (10 mM each) 3.5 μl
模板 DNA/RNA 10 ng~1 μg
*10X Primers 2.5 μl
ddH2O Up to 25 μl
*10X Primers:16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4-8 μM LpF/B each。
2. 65°C 30~60min; 85°C 5min 失活。
使用注意事項(xiàng):
(1) Mg2+的使用濃度為 4~10 mM 濃度,Isothermo Buffer中沒有 Mg2+,通常情況下,在 6-8 mM Mg2+條件下可獲得較好的 LAMP 結(jié)果。
(2) 有文獻(xiàn)報(bào)道加入 Tte Uvrd 解旋酶可改善 LAMP 的效果。
(3) 使用無模板 DNA 作為對(duì)照檢測擴(kuò)增的特異性。
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