細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    巨細胞白血病細胞：M-07e

別稱M-07E; M-O7e; M07-e; M07e; Mo7e; MO7e; M07E; MO7E

種屬人類

年齡（性別）女性，6個月

組織來源外周血

生長特性懸浮細胞

細胞形態(tài)淋巴母細胞樣

背景描述Established from the peripheral blood of a 6-month-old girl with acute megakaryoblastic leukemia (AML M7) at diagnosis in 1987; subline of the growth factor-independent cell line M-07; M-07e cells respond proliferatively to GM-CSF, IFN-alpha, IFN-beta, IFN-gamma, IL-2, IL-3, IL-4, IL-6, IL-15, NGF, SCF, TNF-alpha, TPO; we have noted that the cell line can become very quickly cytokine-independent (within 3-4 weeks), presumably due to outgrowth of independent cells. Exome and RNA sequence data are available

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基RPMI-1640＋10% FBS＋8ng/mL GM-CSF+1% P/S

推薦傳代比例5×10^5-1×10^6cells/mL

推薦換液頻率2~3次/周

倍增時間~40小時

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

抗原表達情況CD3 -, CD13 +, CD14 -, CD19 -, CD33 +, HLA-DR -

注意事項該細胞為懸浮細胞，請注意離心收集細胞懸液；請勿直接倒掉細胞培養(yǎng)液。

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

人 CD8A / MAL ELISA配對抗體

人 CD50 / ICAM-3 ELISA配對抗體

人 CD3d / CD3 delta ELISA配對抗體

人 IL18R1 / CD218a ELISA配對抗體

人 Complement C1s ELISA配對抗體

人 Vitronectin / VTN ELISA配對抗體

人 ECM1 ELISA配對抗體

人 Transferrin / TF ELISA配對抗體

甲型流感 H9N2 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配對抗體

甲

巨細胞白血病細胞：M-07eSyntaxin 1A(brain)  突觸融合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

HDHD2/IER3IP1  HDHD2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

CK14/17/42/10  細胞角蛋白14抗體 規(guī)格: 0.1mlADD1/alpha Adducin  內(nèi)收蛋白a1抗體 0.2ml

LI-cadherin  肝腸鈣粘連蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

CCR9  細胞表面趨化因子受體9抗體 規(guī)格: 0.1ml

CK10  細胞角蛋白10抗體 規(guī)格: 0.1ml

1張 硝酸纖維素膜，13×20 cm (Amersham) Nitrocellulose Membrane 常溫保存

phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr317)  磷酸化蛋白激受體B1抗體 規(guī)格: 0.1mlDHRS7  視網(wǎng)膜短鏈脫/還原家族7抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-Dnmt1(Ser732)  磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移1抗體 規(guī)格: 0.1mlMouse Anti-Goat IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml

C2orf60  2號染色體開放閱讀框抗體 規(guī)格: 0.2ml

30次 高pH 緩沖液套裝 High pH Buffer Set 常溫保存（5×高pH上樣液需要-20℃保存）

250mL Sodium Phosphate Buffer（鈉緩沖液）,0.5M,pH8.5  Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH8.5  常溫保存