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名稱 | HuTu-80 (人十二脂腸腺癌) (STR鑒定正確) |
別稱 | HUTU 80; Hutu 80; HuTu-80; HUTU-80; Hutu-80; HUTU80; HuTu80; Hutu80 |
種屬 | 人類 |
年齡(性別) | 53歲 |
組織來源 | 十二指腸 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
背景描述 | 每個HuTu-80細胞上,蛙皮素受體的位點多達6000個。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | MEM+10% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
致瘤性 | Yes, in nude mice; forms well differentiated papillary adenocarcinoma (grade I). |
受體表達情況 | bombesin |
抗原表達情況 | Blood Type B; Rh+ |
保藏機構(gòu) | ATCC; CRL-7928ATCC; HTB-40 |
細胞傳代:
1. HUTU-80人十二脂腸腺癌試驗準備:200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌),酒精棉球,廢液缸,試管架,微量移液器,記號筆,培養(yǎng)皿,離心管。
2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基,用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。
3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液,消化 1 分鐘(37℃,5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁,觀察到細胞從壁上脫落下來為止。
4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應。
5. 用 Tip 頭多次吹吸,使細胞分散開。
6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中,1000rpm 離心 5min。
7. 用培養(yǎng)液重懸細胞,細胞計數(shù)后選擇 0.8X106 個細胞加入一個 35mm 培養(yǎng)皿。
8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中,混勻細胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中,使其均勻分布。
9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),第二天轉(zhuǎn)染。
細胞轉(zhuǎn)染:
1. 轉(zhuǎn)染試劑的準備
① 將 400ul 去核酸酶水加入管中,震蕩 10 秒鐘,溶解脂狀物。
② 震蕩后將試劑放在-20 攝氏度保存,使用前還需震蕩。
2. 選擇合適的混合比例(1:1-1:2/脂質(zhì)體體積:DNA 質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細胞。在一個轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA,震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑,再次震蕩。
磷suan化糖原合mei激mei3β封閉多肽 | 巨細胞病毒PCR檢測試劑盒 |
塞內(nèi)加谷病毒RT-PCR試劑盒 | 多巴胺β羥化meiELISA試劑盒 |
人β細胞su(BTC) ELISA試劑盒 | 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4ELISA試劑盒 |
人白介su7(IL-7)ELISA檢測試劑盒 | 細胞色suP450家族成員26A1ELISA試劑盒 |
人阿黑皮su原(POMC)elisa試劑盒 | 蛋白mei激活復合體亞基2ELISA試劑盒 |
人蛋白(肽酰脯氨酰順/反異構(gòu)mei)NIMA結(jié)合1(PIN1)試劑盒ELISA | β防御su104ELISA試劑盒 |
細胞質(zhì)膜微囊蛋白-2封閉多肽 | 犬源性成分(Canine)核suan檢測試劑盒 |
肌球蛋白4封閉多肽 | 諾如病毒GⅡ型PCR檢測試劑盒 |
Complexin II/復合su2封閉多肽 | 肉毒桿菌F型(CB-F)核suan檢測試劑盒 |
腫瘤/睪丸抗原2.2/睪丸抗原2.3封閉多肽 | 利什曼原蟲PCR檢測試劑盒 |
CTP合成mei2封閉多肽 | 貓支原體PCR試劑盒 |
高遷移率族蛋白N4封閉多肽 | HUTU-80人十二脂腸腺癌葡萄球菌屬通用PCR試劑盒 |
免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域受體1封閉多肽 | 皮欽德病毒RT-PCR試劑盒 |
白細胞介su36γ封閉多肽 | 貓源性成分PCR試劑盒 |
腫瘤壞死因子受體超家族成員19L封閉多肽 | 貓衣原體PCR試劑盒 |
細胞培養(yǎng)實驗基本操作:
①進無菌室前要洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細胞,同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位,避免直立,以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時,應專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去,以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應整理好工作臺面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面;防止細胞交叉污染:所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細胞遺傳學方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變,可以復蘇早期凍存的細胞使用。