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| 名稱 | Hs 578T (人乳腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
| 別稱 | HS 578T; Hs-578T; HS-578T; Hs_578t; Hs-578-T; HS-578-T; Hs 578.T; HS578T; Hs578T; Hs578t; HS0578T; 578T; HS578; Hs578; Homo sapiens No. 578, tumor cells |
| 種屬 | 人類 |
| 年齡（性別） | 女性，74歲 |
| 組織來源 | 乳腺癌 |
| 生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
| 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
| 背景描述 | Hs 578T細(xì)胞源自乳房癌，它與正常成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞株Hs 578Bst起源于同一位患者。Hs 578T細(xì)胞最初是多角形的，但在傳代過程中選擇并克隆了星形的細(xì)胞形態(tài)。電鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，Hs 578T細(xì)胞內(nèi)酪蛋白顆粒聚集、橋粒緊密連接、脂質(zhì)體和光滑內(nèi)質(zhì)網(wǎng)小泡。Hs 578T細(xì)胞與Hs 578Bst細(xì)胞一樣，未檢測到雌激素受體和內(nèi)生病毒。 |
| 生物安全等級 | 1 |
| 生長培養(yǎng)基 | DMEM＋0.01mg/ml Insulin＋10% FB＋1% P/S |
| 推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
| 推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
| 倍增時間 | ~36-54小時 |
| 凍存條件 | 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 |
| 培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
| 致瘤性 | No, in immunosuppressed mice.Yes, in semisolid medium. |
| 保藏機構(gòu) | ATCC; CRL-7849ATCC; HTB-126 BCRC; 60120 DSMZ; ACC-781 ECACC; 86082104 |
細(xì)胞傳代：
1. HS578T人乳腺癌細(xì)胞試驗準(zhǔn)備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養(yǎng)皿，離心管。
2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。
3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細(xì)胞從壁上脫落下來為止。
4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。
5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細(xì)胞分散開。
6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。
7. 用培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，細(xì)胞計數(shù)后選擇 0.8X106 個細(xì)胞加入一個 35mm 培養(yǎng)皿。
8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中，混勻細(xì)胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布。
9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天轉(zhuǎn)染。
細(xì)胞轉(zhuǎn)染：
1. 轉(zhuǎn)染試劑的準(zhǔn)備
① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。
② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。
2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質(zhì)體體積：DNA 質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細(xì)胞。在一個轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑，再次震蕩。
鳥苷suan還原mei1封閉多肽 | 24柯薩奇病毒24型變種PCR檢測試劑盒 |
蝦肝腸微胞蟲PCR試劑盒 | 端粒重復(fù)結(jié)合因子1ELISA試劑盒 |
人β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)試劑盒ELISA | 蛋白mei激活受體1ELISA試劑盒 |
人臂板蛋白3A(Sema 3A)檢測試劑盒elisa | 囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)因子ELISA試劑盒 |
人αN已酰氨基葡糖苷mei(αNAG)ELISA試劑盒 | 蛋白酪氨suan激meiELISA試劑盒 |
人蛋白mei體(prosome,macropain)亞基,β型,2(PSMB2)試劑盒ELISA | γ谷氨酰半合成meiELISA試劑盒 |
細(xì)胞色suB561結(jié)構(gòu)域蛋白1封閉多肽 | EB病毒(EBV)核suan檢測試劑盒 |
去整合su樣金屬蛋白mei9封閉多肽 | 佩氏著色霉PCR檢測試劑盒 |
CHX10蛋白封閉多肽 | 銅綠假單孢菌(PA）/綠膿桿菌 核suan檢測試劑盒 |
腫瘤/睪丸抗原81封閉多肽 | 空腸彎曲桿菌/大腸彎曲桿菌/海鳥彎曲桿菌flaA基因(450bp)常規(guī)PCR檢測試劑盒 |
CREB結(jié)合蛋白p300封閉多肽 | 貓庖疹病毒PCR檢測試劑盒 |
KB抑制蛋白激meiβ封閉多肽 | HS578T人乳腺癌細(xì)胞七星庫道蟲PCR試劑盒 |
磷suan化磷脂酰肌醇激meiPIK3-γ封閉多肽 | 蘋果銹果類病毒RT-PCR試劑盒 |
HOXB4封閉多肽 | 貓免疫缺陷病毒PCR試劑盒 |
細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-2封閉多肽 | 貓附紅細(xì)胞體PCR試劑盒 |
細(xì)胞培養(yǎng)實驗基本操作：
①進無菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細(xì)胞，同時塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細(xì)胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。
