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名稱 | MOLT-4 (人急性淋巴母細胞白血病細胞) (STR鑒定正確) |
別稱 | Molt-4; MOLT 4; Molt 4; MOLT.4; MOLT4; Molt4; GM02219; GM02219C; GM2219C |
種屬 | 人類 |
年齡（性別） | 男性，19歲 |
組織來源 | T淋巴母細胞；急性淋巴母細胞白血病 |
生長特性 | 懸浮細胞 |
細胞形態(tài) | 淋巴母細胞樣 |
背景描述 | MOLT-4細胞是從一位復發(fā)病人的細胞中建立。這個病人接受過多種藥物聯(lián)合前期化l療，p53基因的248位密碼子有一個G→A突變，p53不表達。MOLT-4細胞不生成免疫球蛋白或EB病毒；MOLT-4細胞與MOLT-3細胞均來源于同一位病人。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 4×10^5個/mL |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~24-48小時 |
凍存條件 | 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 |
培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
致瘤性 | Yes, in untreated nude mice, anti lymphocyte serum treated mice and X-irradiated mice. |
抗原表達情況 | CD1 (49%), CD2 (35%), CD3 A (26%) B (33%) C (34%), CD4 (55%), CD5 (72%), CD6 (22%), CD7 (77%) |
基因表達情況 | high levels of terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) are produced. |
保藏機構(gòu) | ATCC; CRL-1582 DSMZ; ACC-362 ECACC; 85011413 ECACC; 94022544 |
細胞傳代：
1. MOLT-4人急性淋巴母細胞白血病細胞試驗準備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養(yǎng)皿，離心管。
2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。
3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細胞從壁上脫落下來為止。
4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應。
5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細胞分散開。
6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。
7. 用培養(yǎng)液重懸細胞，細胞計數(shù)后選擇 0.8X106 個細胞加入一個 35mm 培養(yǎng)皿。
8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中，混勻細胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布。
9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天轉(zhuǎn)染。
細胞轉(zhuǎn)染：
1. 轉(zhuǎn)染試劑的準備
① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。
② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。
2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質(zhì)體體積：DNA 質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細胞。在一個轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑，再次震蕩。
環(huán)腺苷suan應答元件結(jié)合蛋白封閉多肽 | 腸致病性大腸桿菌PCR檢測試劑盒 |
卡奇谷病毒RT-PCR試劑盒 | 法尼基二磷suan法尼基轉(zhuǎn)移mei1ELISA試劑盒 |
人白介su23A(IL-23A)ELISA試劑盒 | 多聚血清蛋白ELISA試劑盒 |
人β2轉(zhuǎn)鐵蛋白(β2TF)檢測試劑盒elisa | 促睡眠肽ELISA試劑盒 |
小鼠白介su13(IL-13)ELISA試劑盒 | 對稱二甲基精氨suanELISA試劑盒 |
人suan脫氫meiE1(PDH E1)試劑盒ELISA | Q熱科克斯體1ELISA試劑盒 |
熱休克蛋白70樣蛋白1封閉多肽 | 甲型/乙型/甲型H1N1(2009)/季節(jié)性H3亞型流感病毒PCR檢測試劑盒 |
尾外致密纖維3樣蛋白1封閉多肽 | 牛輪狀病毒通用PCR檢測試劑盒 |
C型凝集su結(jié)構(gòu)域家族1成員A封閉多肽 | 口蹄疫O型/A型/Asia型(FMDV-O/-A/-Asia)核suan檢測試劑盒 |
致癌基因C-Myc封閉多肽 | 病毒H5亞型PCR檢測試劑盒 |
DeltaD封閉多肽 | 牡蠣包拉米蟲PCR試劑盒 |
磷suan化埃茲蛋白封閉多肽 | MOLT-4人急性淋巴母細胞白血病細胞牛乳頭瘤病毒PCR檢測試劑盒 |
跨膜蛋白Sema3C封閉多肽 | 牛輪狀病毒通用RT-PCR試劑盒 |
芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣1封閉多肽 | 莫氏巴貝斯蟲PCR試劑盒 |
甘油二酯激meiι/DGK-ι封閉多肽 | 牡蠣包拉米蟲PCR檢測試劑盒說明書 |
細胞培養(yǎng)實驗基本操作：
①進無菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復蘇早期凍存的細胞使用。
