特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
名稱 | NIH/3T3 (小鼠胚胎細(xì)胞) (種屬鑒定正確) |
別稱 | NIH/3T3; NIH-3T3; NIH3T3; 3T3; 3T3NIH; 3T3-Swiss; Swiss-3T3; Swiss/3T3; Swiss 3T3; Swiss3T3 |
種屬 | 小鼠 |
年齡(性別) | 胚胎 |
組織來源 | 胚胎 |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
背景描述 | NIH/3T3細(xì)胞是從NIH Swiss小鼠胚胎培養(yǎng)物中建立的高度接觸性抑制的連續(xù)傳代細(xì)胞株。為了培育在形態(tài)學(xué)特征上更適合于進(jìn)行轉(zhuǎn)化分析的亞株,建立的NIH/3T3細(xì)胞株又進(jìn)行了5輪以上亞克隆。NIH/3T3細(xì)胞對(duì)肉瘤病毒的轉(zhuǎn)化灶形成和白血病病毒的繁殖高度敏感,對(duì)DNA轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)染研究十分有用;NIH/3T3細(xì)胞鼠痘病毒陰性。 |
生物安全等級(jí) | 1 |
生長培養(yǎng)基 | DMEM+10% CS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時(shí)間 | ~20小時(shí) |
凍存條件 | 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40?S+5%DMSO 溫度:液氮 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; CRL-1658 ATCC; CRL-6442DSMZ; ACC-59 ECACC; 93061524 |
細(xì)胞系跟細(xì)胞株的區(qū)別:
1、細(xì)胞株:NIH/3T3小鼠胚胎細(xì)胞原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細(xì)胞的生長就會(huì)出現(xiàn)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)”而繼續(xù)傳下去,這些存活的細(xì)胞一般能夠傳到40--50代,這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞株。
2、細(xì)胞系:細(xì)胞株的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變。當(dāng)細(xì)胞傳至50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)”,不能再傳下去。但是有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變,并且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn),有可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去,這種傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞系。
注意事項(xiàng):
1. 細(xì)胞較難消化,需要延長消化時(shí)間,消化收縮變圓時(shí),輕拍側(cè)邊方可終止消化
2. 推薦使用培養(yǎng)基,10%胎牛血清
3. 推薦傳代比例為1:3至1:4,建議37度消化3-4分鐘
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收到細(xì)胞后如何操作:
1、首先,觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)及時(shí)與我司技術(shù)支持聯(lián)系。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出進(jìn)行觀察。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
4、可將培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管中,備用;細(xì)胞傳代時(shí),可以將該培養(yǎng)基按照一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合使用,讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5、確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好后,應(yīng)及時(shí)將細(xì)胞凍存,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn),避免后期實(shí)驗(yàn)失誤可能發(fā)生細(xì)胞污染或死亡而導(dǎo)致的細(xì)胞丟失。
6、建議客戶收到細(xì)胞后前3天,100X、200X、400X各拍3-5張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我們技術(shù)支持溝通交流。