儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
規(guī)格參數(shù):
資源名稱 幽門(mén)螺桿菌保存
種屬: Helicobacter│pylori
分離基物: 胃標(biāo)本
提供形式: 凍結(jié)物
安全等級(jí): 2
模式菌株: no
培養(yǎng)基: CM0021
生長(zhǎng)條件: 37℃
存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
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培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無(wú)菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無(wú)菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
產(chǎn)品僅用于科研生長(zhǎng)條件 30℃,好氧
存儲(chǔ)條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過(guò)分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過(guò)程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無(wú)菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無(wú)菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,產(chǎn)品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過(guò)渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來(lái)長(zhǎng)期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。
Avian Orthoreovirus禽正呼腸孤病毒RT-LAMP試劑盒英文名稱:Annexin V-EGFP/PI Apoptosis Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格:20 rxn
發(fā)貨周期:1~3天
Annexin V-EGFP/PI細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Annexin V-EGFP/PI Apoptosis Detection Kit)是用EGFP標(biāo)記了的Annexin V作為探針,來(lái)檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的發(fā)生,可用熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀或其他熒光檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)。
其檢測(cè)原理為:在正常的活細(xì)胞中,磷脂酰絲氨酸(phosphotidylserine,PS)位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè),但在早期凋亡的細(xì)胞中,PS 從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面,暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。Annexin-Ⅴ(膜聯(lián)蛋白-V)是一種分子量為35-36KD的Ca2+ 依賴性磷脂結(jié)合蛋白,能與PS高親和力結(jié)合??赏ㄟ^(guò)細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。
另外,本試劑盒中還提供了化丙啶(Propidium Iodide,PI)用來(lái)區(qū)分存活的早期細(xì)胞和壞死或晚期凋亡細(xì)胞。PI是一種核酸染料,它不能透過(guò)正常細(xì)胞或早期凋亡細(xì)胞的完整的細(xì)胞膜,但可以透過(guò)凋亡晚期和壞死細(xì)胞的細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅。因此,將Annexin V與PI聯(lián)合使用時(shí),PI 則被排除在活細(xì)胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡細(xì)胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞同時(shí)被EGFP 和PI 結(jié)合染色呈現(xiàn)雙陽(yáng)性(Annexin V+/PI+)。
產(chǎn)品組份:
Annexin V-EGFP———————100 μl
PI Staining Solution————100 μl
1×Binding Buffer——————8 ml
儲(chǔ)存條件:4℃,有效期一年。
甲醇中1,1,2,2-四氯乙烷溶液 1.2ml Actimadura pelletieri白樂(lè)杰馬杜拉放線菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
甲醇中1,1,2-三氯乙烷溶液 1.2ml Actimyces bovis牛型放線菌PCR試劑盒
甲醇中1,2,3-三氯苯溶液 1.2ml Actimyces bovis牛型放線菌染料法熒光定量PCR試劑盒
甲醇中1,2,4-三溶液 1.2ml Actimyces bovis牛型放線菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
甲醇中1,3,5-三溶液 1.2ml Actimyces europaeus歐洲放線菌PCR試劑盒
正己烷中滅蟻靈溶液 1.2ml Actimyces europaeus歐洲放線菌染料法熒光定量PCR試劑盒
甲醇中多氯聯(lián)苯溶液(Aroclor 1260) 1.2ml Actimyces europaeus歐洲放線菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
甲醇中多氯聯(lián)苯溶液(Aroclor 1254) 1.2ml Actimyces gerencseriae戈氏放線菌PCR試劑盒
甲醇中多氯聯(lián)苯溶液(Aroclor 1248) 1.2ml Actimyces gerencseriae戈氏放線菌染料法熒光定量PCR試劑盒
正己烷中十氯聯(lián)苯溶液(PCB 209) 1.2ml Actimyces gerencseriae戈氏放線菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
正己烷中2,2’,3,4,4’,5’-六氯聯(lián)苯溶液(PCB 138) 1.2ml Actimyces israelii衣氏放線菌PCR試劑盒
正己烷中2,2',4,5,5'-五氯聯(lián)苯溶液(PCB 101) 1.2ml Actimyces israelii衣氏放線菌染料法熒光定量PCR試劑盒
正己烷中2,4,4’-三氯聯(lián)苯溶液(PCB 28) 1.2ml Actimyces israelii衣氏放線菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
正己烷中2,2’,5,5’-四氯聯(lián)苯溶液(PCB 52) 1.2ml Actimyces naeslundii內(nèi)氏放線菌PCR試劑盒
正己烷中2,3',4,4',5-五氯聯(lián)苯溶液(PCB 118) 1.2ml Actimyces naeslundii內(nèi)氏放線菌染料法熒光定量PCR試劑盒
幽門(mén)螺桿菌保存人抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒 英文名稱:Human anti-centrol and centrosome antibody,ACA ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)ELISA試劑盒英文名稱:human anti-neutrophil cytoplasmic antibody,cANCA ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA試劑盒英文名稱:Human Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody,pANCA ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人抗中性粒細(xì)胞抗體(ANA)ELISA試劑盒 英文名稱:Human anti-neutrophil antibody,ANA ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人抗中性粒細(xì)胞顆??贵w(ANGA)ELISA試劑盒英文名稱:Human anti-neutrophil granules antibody,ANGA ELISA Kit*
人抗滋養(yǎng)膜細(xì)胞抗體(ATA)ELISA試劑盒英文名稱:Human anti-trophoblast antibody,ATA ELISA Kit進(jìn)口/原裝