微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
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產(chǎn)品名稱 | 用途 | 貨號 |
斯氏李斯特氏菌 | 僅供科研 | GOY-01J6564
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菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達(dá)10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護(hù)劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
二甲氧烷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8% (GC)乙二苯 98%Anti-AMPK alpha 2 腺苷單活化蛋白激α2抗體
烯酸 N,N-二乙基乙酯 95%6-羥基-2-萘甲酸 98%Anti-AMPK beta 1 腺苷單活化蛋白激β1抗體
1,3-二羥基酮,二聚體 97%對羥基苯甲酸 99%Anti-phospho-AMPK beta 1(Ser108) 化腺苷單活化蛋白激β1抗體
2,2-二羥基偶氮苯 97%對羥基苯甲酸 ≥99%Anti-phospho-AMPK beta 1(Ser182) 化腺苷單活化蛋白激β1抗體
二十二碳六烯酸甲酯 98%4-羥基苯甲酸異丁酯 99%Anti-Amylin 糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體
二十二碳六烯酸甲酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%4-羥基苯甲酸異酯 99%Anti-beta-Amyloid 1-42(CT) β淀粉樣肽1-42 (C端)抗體
鄰苯二甲酸二丁酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品對羥基苯甲酸甲酯鈉 99%Anti-beta-Amyloid(1-16) (human) β淀粉樣肽(1-16)抗體(人)
2,4-二氯苯氧乙酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品對羥基苯甲酸甲酯鈉 Ph EurAnti-beta-Amyloid(1-16) β淀粉樣肽(1-16)抗體(小鼠、大鼠)
斯氏李斯特氏菌鹽西替利 98%牛白介素1β(IL-1β)免疫試劑盒FAM153B蛋白抗體Mouse Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG
5-氧化 98%牛白介素17(IL-17)免疫試劑盒FAM46C蛋白抗體Mouse Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG
2-(二環(huán)己膦)聯(lián) 98%牛白介素12(IL-12)免疫試劑盒舌癌化療耐藥相關(guān)蛋白1Mouse Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG
2,6-二氟-4-羥 98%牛白介素10(IL-10)免疫試劑盒FAM129B蛋白抗體Mouse Anti-Guinea pig IgG 小鼠抗豚鼠IgG
2,4-二巰嘧 98%牛白介素1(IL-1)免疫試劑盒微管動力調(diào)節(jié)蛋白2抗體Mouse Anti-Goat IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的小鼠抗羊IgG
(S)-(+)-2,2-二環(huán)烷酰 98%牛γ干擾素(IFN-γ)免疫試劑盒FAM50A蛋白抗體Mouse Anti-Goat IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗羊IgG
(S, S)-環(huán)己二 98%牛γ氨丁(GABA)免疫試劑盒FAM113A蛋白抗體Mouse Anti-Goat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗羊IgG
(R, R)-環(huán)己二 98%牛β-球蛋白(β-LG)(過敏原Bosd5)(LGB)免疫試劑盒FAM150A蛋白抗體Mouse Anti-Goat IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗羊IgG
N,N’-二(氨乙)-哌 99%牛β羥丁脫氫(β-HBDH)免疫試劑盒FRMD8蛋白抗體Mouse Anti-Goat IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗羊IgG
3,5-二氟芐 97%牛β羥丁(βOHB)免疫試劑盒FGFR1癌因伴侶蛋白抗體Mouse Anti-Goat IgG/PE PE標(biāo)記的小鼠抗羊IgG
羥哌 97%牛β內(nèi)啡肽(β-EP)免疫試劑盒FAM家族蛋白40A抗體Mouse Anti-Goat IgG/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的小鼠抗羊IgG
2,6-二并噻唑 98%牛β干擾素(IFN-β/IFNB)免疫試劑盒FAM55D蛋白抗體Mouse Anti-Goat IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的小鼠抗羊IgG
6,6′-二-2,2′-聯(lián)吡 98.0 %牛β-防御素(β-Defensins)免疫試劑盒組織激活過氧化活化增生受體γ蛋白抗體Mouse Anti-Goat IgG/FITC FITC標(biāo)記的小鼠抗羊IgG
1-乙-(3-二氨)碳二亞鹽鹽 98.5% 牛α清蛋白(α-La)免疫試劑盒FAM21C蛋白抗體Mouse Anti-Goat IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的小鼠抗羊IgG
2-氨噻唑-4-乙酯 98%牛α晶體B鏈(CRYAB)免疫試劑盒FAM13C1蛋白抗體Mouse Anti-Goat IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗羊IgG