保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
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產(chǎn)品名稱 | 用途 | 貨號 |
玖紅穗狀霉 | 僅供科研 | GOY-01J6716 |
菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
BOC-β- 98%胰蛋白(豬胰臟) 1:250Anti-S100A13/FITC 熒光素標記鈣結(jié)合蛋白S100A13抗體IgG
叔丁氧羰基-L-天冬-4-叔丁酯 99%氯化亞銅 AR,97%Anti-Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235/236)/FITC 熒光素標記化S6核糖體蛋白抗體IgG
N-叔丁氧羰基-L-谷5-芐酯 97%氯化亞銅 CP,93%Anti-Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) /FITC 熒光素標記化S6核糖體蛋白抗體IgG
N-Boc-L-天冬-5-叔丁酯 98%氯化亞銅 99.999% metals basisAnti-S100B/FITC 熒光素標記S100B蛋白抗體IgG
BOC-D-谷5-叔丁酯 98%氯化亞銅 ≥99.95% metals basisAnti-S6PDH/FITC 熒光素標記抗6-山梨脫氫抗體IgG
Boc-組 99%槲皮素,二水 97%Anti-SAMDC/AMD1/FITC 熒光素標記S-腺苷蛋脫羧抗體IgG
Boc-D-異亮 98%槲皮素 97%Anti-SARS S-protein/FITC 熒光素標記非典病表面蛋白S抗體IgG
N-叔丁氧羰基-賴甲酯 98.5%槲皮素,二水 分析標準品,≥98% (HPLC)Anti-SARS putative orflab polyprotein/FITC 熒光素標記SARS抗體IgG
玖紅穗狀霉4- 99%小鼠高靈敏度促狀(U-TSH)免疫試劑盒白抗原B相關(guān)轉(zhuǎn)錄蛋白5抗體SLC40A1 膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白FP1抗體
4- ≥99%, FCC, Kosher小鼠高爾蛋白73(GP-73)免疫試劑盒BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白1(型肝炎病的NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8)抗體SLC39A7 轉(zhuǎn)運蛋白家族39成員7抗體
麥芽酚 99%小鼠高半胱氨(Hcy)免疫試劑盒BCL7B蛋白抗體SLC39A6 SLC39A6抗體
麥芽酚 99%,FCC,FG小鼠肝脂(HL)免疫試劑盒堿性核蛋白2(鋅指蛋白basonuclin2)抗體SLC39A11 溶質(zhì)載體家族39成員11抗體
二氫茉莉酮酯 96%小鼠肝臟型脂肪結(jié)合蛋白(L-FABP)免疫試劑盒B白血病/淋巴瘤蛋白7抗體SLC37A4/G6PT2 葡萄糖-6轉(zhuǎn)運蛋白抗體
對氧 98%小鼠肝生長因子受體(c-MET/HGFR)免疫試劑盒先天性脂肪代謝障礙蛋白2抗體(常染色體顯性遺傳痙攣性截癱17)SLC34A2 鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白抗體
庚炔羧酯 ≥99%, FCC, Kosher, FG小鼠肝生長因子激活物(HGFAC)免疫試劑盒B遷移因1抗體SLC33A1 乙酰輔A轉(zhuǎn)運蛋白1抗體
庚炔羧酯 98%小鼠肝生長因子(HGF)免疫試劑盒脊髓小腦共濟失調(diào)蛋白BEAN1抗體SLC30A3/ZNT3 溶質(zhì)載體鋅轉(zhuǎn)運3抗體
鄰氨酯 99%小鼠甘油三酯(TG)免疫試劑盒B7H6蛋白抗體SLC2A4RG/GLUT4 enhancer factor 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4增強因子抗體
鄰氨酯 ≥98%, FCC,FG小鼠甘油-3-脫氫(GAPDH/G3PDH)免疫試劑盒B特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體SLC29A4 腦質(zhì)膜單轉(zhuǎn)運蛋白PMAT抗體
2-丁乙酯 99%小鼠干因子/肥大生長因子(SCF/MGF)免疫試劑盒橋連整合因子蛋白抗體SLC27A6/ACSVL2 脂肪轉(zhuǎn)運蛋白6抗體
2--1--2- 99%小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫試劑盒BADH2抗體(水稻)SLC27A5 脂肪轉(zhuǎn)運蛋白5抗體
2-壬炔酯 98%小鼠干擾素調(diào)節(jié)因子5(IRF5)免疫試劑盒丁酰酯單克隆抗體SLC27A2/ACSVL1 長鏈脂肪輔A連接抗體
2-壬炔酯 Kosher, ≥99%小鼠鈣衛(wèi)蛋白(CALP)免疫試劑盒化β 連環(huán)素蛋白抗體SLC27A1 長鏈脂肪轉(zhuǎn)運蛋白1抗體
2--1--2- ≥97%小鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)免疫試劑盒β-球蛋白抗體Slc26a5 感覺神經(jīng)性耳聾常染色體隱性遺傳61抗體