美國ABI 7500型熒光定量PCR
· 五色熒光檢測,應用更廣泛全面,包括:基因表達分析,病原體定量分析,SNP基因型分析以及以陽性內對照為基礎的陽性/陰性結果判定
· 新型光路設計支持更多的熒光標記檢測,包括:FAM™/SYBR® Green I, VIC®/JOE, NED™/ TAMRA™/ Cy3®, ROX™/Texas Red®,和Cy5®;
更好的激發(fā)光源設計使長波長紅色熒光的檢測靈敏度大大提高
· 強大而靈活的反應板設置指南軟件使反應板設置非常方便,*的實驗結果顯示與自動分析工具使實驗數(shù)據(jù)的分析處理更簡單直觀
· 型半導體熱循環(huán)系統(tǒng)支持96孔板和單一0.2ml反應管。
· 將來可以升級至超速定量PCR反應模式,大大縮短定量PCR反應時間
· 體積小,采用手提電腦或臺式電腦,適用于任何空間的實驗室。
美國ABI 7500型熒光定量PCR 產品簡介:
7500型實時定量PCR儀是特異性靶基因檢測與定量的一體化平臺。7500將PCR熱循環(huán),熒光檢測和各種應用分析軟件結合在一起,可以動態(tài)觀察PCR每一循環(huán)各反應管中PCR擴增產物逐漸增加的情況。PCR實驗結束后可以馬上得到定量結果,無需凝膠電泳分析,無需純化PCR產物,無需進行任何實驗操作。7500型實時熒光定量PCR儀采用96孔反應板或單個及8聯(lián)管,反應體積25-100微升,實驗可以在不到2小時內結束。與其他人工基因定量分析方法如Northern blotting or RNase-protection assays相比,7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)具有時間省,靈敏度高,準確性好和線性范圍寬等優(yōu)點。7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)由實時定量PCR技術的*—美國應用生物系統(tǒng)公司于2004年1月推出,它質量優(yōu)異,實驗結果準確可信,性能價格比極其*。
實時定量PCR的主要應用:
實時定量PCR應用廣泛,包括基于相對定量分析的基因表達分析,以標準曲線為基礎的病原體定量分析,定性的PCR擴增后核酸序列的SNP基因型分析,以及以陽性內對照為基礎的陽性/陰性結果判定
快速熱循環(huán)
7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)的標準模式采用25-100微升反應體積,可以采用96孔板或單管/8聯(lián)管進行實驗反應。另外7500還可以升級為快速熱循環(huán)樣品基座,該升級為選購件,由AB公司工程師負責安裝??焖贌嵫h(huán)樣品基座采用新型96孔反應板,這種反應板的管內液體上方的空間較小,可以支持5-30微升反應體積的實驗。采用樣品基座升級后的7500,新型96孔反應板和新型快速熱循環(huán)定量PCR預混試劑,實時定量PCR實驗可以在40分鐘內完成,實驗效果與標準2小時模式**。.
實時定量PCR系統(tǒng)分析軟件:
7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)軟件采用Windows XP®操作系統(tǒng),進行儀器控制,數(shù)據(jù)收集和數(shù)據(jù)分析,軟件功能強大,界面友好,包括如下特色:
*反應板設置指南,使實驗設計非常簡單,即使是復雜的多重定量實驗也是如此。
*擴增反應曲線的實時監(jiān)測
*自動設定熒光基線,自動計算熒光閾值使實驗結果分析大大簡化
*采用標準曲線進行靶基因的定量
*基因表達相對定量軟件提供強大的結果分析顯示,可以自動將多達10塊96孔板基因表達實驗的數(shù)據(jù)同時分析,并自動去除無關項數(shù)據(jù),該軟件為選購件
*自動SNP分型軟件以直觀的圖表輸出分型結果并自動進行分型質量評分
*解離曲線數(shù)據(jù)采集操作簡單觀察方便,可以在儀器運行時觀察解離曲線數(shù)據(jù)
*觀察實時擴增曲線時可以非常方便的標定所對應的樣品孔位置
*光源使用時間監(jiān)測及儀器系統(tǒng)自我診斷程序
熒光信號檢測:
7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)的全部96個樣品孔采用同一鹵鎢燈作為光源,鹵鎢燈光通過五色光源濾光片后激發(fā)每一個分析樣品。鹵鎢燈光源增加光源濾光片后改善了長波長紅色熒光標記的激發(fā)效果,可以大大提高紅色熒光檢測的靈敏度和定量分析的準確性。激發(fā)后的熒光再通過五色熒光濾光片到達CCD照相機檢測信號。五色熒光濾光片能夠有效地分辨包括:FAM™/SYBR® Green I, VIC®/JOE, NED™/TAMRA™/ Cy3®, ROX™/Texas Red®和Cy5®在內的多種熒光染料。
儀器技術指標
熱循環(huán)系統(tǒng) | 新型半導體,96個樣品孔,可以升級到96孔快速熱循環(huán)樣品基座 | |
光學系統(tǒng) | 5色激發(fā)光源,5色熒光濾光片和超低溫CCD成像系統(tǒng) | |
Run Variables | 標準運行模式 |
快速運行模式 |
定量PCR運行時間 | 2 小時 | <40分鐘 |
樣品管類型 | 96孔板或0.2-mL單管 | 96孔板 |
反應體積 | 25–100 微升 | 5–30微升 |
電腦技術指標:
美國應用生物系統(tǒng)公司為7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)提供配套的Dell™商用系列電腦(客戶可以選擇手提電腦或臺式電腦),有關電腦的配置,請訪問我公司:www.appliedbiosystems。。com.
安裝技術指標:
在使用TaqMan®的RNA合成酶P儀器安裝板的情況下,7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)能夠區(qū)分5,000和10,000模板拷貝數(shù),其置信度高達99.7%
儀器性能:
7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)經過驗證可以達到如下性能目標:
· 9個數(shù)量級的線性范圍
· 可以檢測50ul反應體積單一報告熒光TaqMan實驗中僅10個起始拷貝數(shù)的模板,其置信度高達99.7%
試劑與消耗品:
7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)可使用全套定量PCR試劑與消耗品,包括:TaqMan® PCR通用預混試劑, SYBR® Green I預混試劑,96孔反應板及0.2ml反應管
TaqMan® Assays-on-Demand™ and TaqMan® Assays-by-Design™應用試劑盒:
美國應用生物系統(tǒng)公司為7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)提供各種配套的TaqMan定量PCR應用試劑盒,這些試劑盒均經過嚴格的質量控制,可以拿來直接使用