檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在450 nm處測吸光值。
產品名稱 | 魚內皮素1(ET-1)elisa試劑盒 |
英文名稱 | Fish endothelin 1,ET-1 ELISA kit |
貨號 | GOY-F74825 |
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實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數。?
公司采用的全是進口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務,各種種屬ELISA試劑盒產品齊全,質量可靠。
操作步驟:
1)運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據待測樣品數量加上規(guī)范品的數量決議所需的板條數。每個規(guī)范品和空白孔主張做復孔。每個樣品依據自個的數量來定,能運用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應當即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
魚內皮素1(ET-1)elisa試劑盒樣品收集、處理及保存:
1).細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現沉淀,應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
二四酸四鈉鹽二水PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit氨甲基四氫吡喃
十二烷基-β-D-麥芽糖苷;月桂?;溠刻擒誇oxP3 (D6O8R) Rabbit mAb八甲基環(huán)四硅氧烷
鹽酸氨基脲FoxP3 (D6O8R) Rabbit mAb4,5-二氟-2-甲酸
硫酸鏈霉素滅菌溶液,30 mg/mlTHOC4/ALY (D3R4R) Rabbit mAb二甲酚
酰Smad 1/5/9 Antibody Sampler Kit1,8-萘內酰亞
1,雙(三羥甲基)甲基氨基烷Plasminogen AntibodyN-1-Boc-2-哌甲酸甲酯
萘酰(AR)VEGF Receptor 2 (D5B1) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)1-BOC-哌甲酸甲酯
氫氧化鋇八水c-Rel (D5G1A) Rabbit mAb (ChIP Formulad)-(三氟甲氧基)甲
鐵屑(>98%,BC)CABIN1 (D2B9F) Rabbit mAb(S)-2-Boc-氨基-1,丁
檸檬酸鐵(>98%,BR)IL-17RA (D1Y4C) Rabbit mAb溴-2-氟吡啶
無水亞硫酸鈉(>98%,BC)Phospho-CAD (Ser1859) Antibody1-氨基-1-環(huán)烷鹽酸鹽
DL-酸(85~90%,BR)PANK4 (D6J4R) Rabbit mAb(1R)-1-(3,5-雙三氟基)
DL-酸(USP)Endosomal Marker Antibody Sampler Kit6-溴-7-氟喹啉
硫酸氫鈉一水(>98%,BC)Reptin/RuvBL2 (D8N3J) Rabbit mAb氟-溴溴芐
檸檬酸三銨MEK1 (D2R1O) Rabbit mAb4,5-二-2-硝
鉻天青S(Ind Grade)SirT2 (D4S6J) Rabbit mAb間甲
5'-三酸胞苷二鈉鹽RAD21 (D5Y8S) Rabbit mAb2-代甲
化鋇二水Initiator Caspases Antibody Sampler Kit2-甲氧基
Dimethyl maleate,96%通用試劑 100G
Ethyl salicylate,≥96%通用試劑 100G
Trimethyl phosphate,≥99%通用試劑 250G
Tri(2-ethylhexyl)phosphate,≥98.0%通用試劑 100ML
Bis(2-ethylhexyl)phosphate,97%通用試劑 25G
Triphenyl phosphate,≥99%通用試劑 50G
Triphenyl phosphite,97%通用試劑 100G
Trimethyl borate,≥99.0%通用試劑 100ML
Triethyl borate,99%通用試劑 25ML
Tripropyl borate,98%通用試劑 25G
Tributyl borate,≥99.0%通用試劑 100ML
Trimethyl orthoformate,99%通用試劑 100ML
Triethyl orthoformate,≥98.0%通用試劑 50ML
Trimethyl citrate,≥98.0%通用試劑 1G
1-Naphthyl acetate,≥98.0%通用試劑 5G