檢測程序：
1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標儀在450 nm處測吸光值。

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實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備；
2. 加樣（標準品及樣本）100µL，37°C孵育1小時；
3. 吸棄，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。
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操作步驟：
1）運用前，將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫，防止加樣時參加很多的氣泡，發(fā)生加樣上的差錯。
2）依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定，能運用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3）參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，悄悄振動混勻，37℃溫育1小時。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
5）每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
7）每孔參加底物A、B各50ul，悄悄振動混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。
8）取出酶標板，敏捷參加50ul停止液，參加停止液后應(yīng)當即測定成果。
9）在450nm波利益測定各孔的OD值。
PCK elisa試劑盒廠家樣品收集、處理及保存：
1）.細胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2）細胞：用PBS反復(fù)洗滌細胞3次，調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份，或者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3）血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4）血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5）體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.）組織標本：切取組織標本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
GLP1類似蛋白Exendin4抗體Prosin B別名: 分子式: C14H18O2性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品；中藥標準品；植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫

磷化真核翻譯起始因子4B抗體8-Epicrepiside E別名: 8-Epidesacylcynaropicrin glucoside分子式: C21H28O9性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品；中藥標準品；植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫

上皮細胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體10(14)-Cadinene-4,11-diol別名: 分子式: C15H26O2性狀: Oil純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫

磷化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體1β-Hydroxytorilin別名: 分子式: C22H32O6性狀: Oil純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫

磷化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體3-Eudesmene-1β,11-diol別名: 分子式: C15H26O2性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫

磷化表皮生長因子受體抗體8-O-Acetyltorilolone別名: 分子式: C17H26O4性狀: Oil純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫

磷化表皮生長因子受體抗體Sugetriol 6,9-diaceta別名: 分子式: C19H28O5性狀: Oil純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫

磷化表皮生長因子受體抗體cis-3,4-Dihydroxy-β-ionone別名: 分子式: C13H20O3性狀: Oil純度: 96.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫
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