Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胃癌細(xì)胞;MKN-45-Cas9-526培養(yǎng)凍存過程:
將貼壁細(xì)胞消化后離心收集,懸浮細(xì)胞直接離心收集,以*培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細(xì)胞至終濃度約106/ml,加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中,用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜,次日保存到液氮中。
公司出售細(xì)胞培養(yǎng)、人細(xì)胞培養(yǎng)、小鼠細(xì)胞培養(yǎng)、大鼠細(xì)胞培養(yǎng)等動(dòng)物細(xì)胞,幾乎能滿足多數(shù)客戶的實(shí)驗(yàn)要求。公司是廣大顧客細(xì)胞購買理想的單位之一。細(xì)胞詳細(xì)參數(shù)如下:
1) 用途:提供用于科研的穩(wěn)定細(xì)胞系
2) 包裝規(guī)格:25cm*cm(>1000000個(gè)細(xì)胞)
3) 保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
4) 細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胃癌細(xì)胞;MKN-45-Cas9-526培養(yǎng)
形態(tài)特性 圓形
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使MKN45細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 20%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 建議初始濃度2.0×105 cells/ml,1:3傳代;4~5天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:12,12;D12S391:26,26;D13S317:8,11;D16S539:10,10;D18S51:16,16;D19S433:14,16.2;D21S11:31,31;D2S1338:18,18;D3S1358:15,16;D5S818:10,11;D6S1043:14,14;D7S820:10,11;D8S1179:13,17;FGA:19,24;Penta E:10,10;TH01:7,7;TPOX:8,8;vWA:19,19;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胃癌細(xì)胞;MKN-45-Cas9-526培養(yǎng)細(xì)胞株培養(yǎng)的具體無菌技術(shù)要點(diǎn):
1. 實(shí)驗(yàn)開始前,無菌室和無菌操作臺需要紫外光照射30到60分鐘*滅菌,用70%擦拭無菌操作臺面,并且打開無菌操作臺風(fēng)扇運(yùn)行10分鐘之后,才可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只能處理一株細(xì)胞株,即使培養(yǎng)基*相同也不可共用培養(yǎng)基,以避免細(xì)胞間污染或失誤混淆。實(shí)驗(yàn)完成后,請將實(shí)驗(yàn)物品拿出工作臺,用70%再次擦拭無菌操作臺面。操作間隔應(yīng)該讓無菌操作臺運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘到15分鐘后,才能進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株的操作。
2. 無菌操作工作的區(qū)域應(yīng)保持清潔和寬敞,必要物品(試管架、吸管、吸取器或吸管盒等)可以暫時(shí)放置,其它實(shí)驗(yàn)用品使用完畢后應(yīng)移出,有利于空氣流通。實(shí)驗(yàn)用品需70%擦拭后方可帶入無菌操作臺內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作過程應(yīng)在臺面的中央無菌區(qū)域內(nèi)完成,請勿在邊緣非無菌區(qū)域進(jìn)行操作。
3. 小心取用無菌實(shí)驗(yàn)物品,避免細(xì)菌污染。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處,也不要在打開的容器正上方進(jìn)行操作。容器打開后,請用手夾住瓶蓋并輕握瓶身,傾斜大約45°角取用,盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。
4. 工作人員應(yīng)當(dāng)首先注意自身安全,必須穿戴齊實(shí)驗(yàn)衣和實(shí)驗(yàn)手套后才能進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對于病毒感染或是來自人類的細(xì)胞株應(yīng)當(dāng)特別小心操作,并選擇適當(dāng)?shù)燃壍臒o菌操作臺進(jìn)行(至少是Class II)。操作過程中,應(yīng)避免引起aerosol的產(chǎn)生,小心有毒性藥品,例如DMSO和TPA等,并避免針頭的傷害等等。
5. 定期檢測下列項(xiàng)目:
5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力
5.2. CO2培養(yǎng)箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染(水盤的水需用無菌水,每周定時(shí)更換)。
5.3. 無菌操作臺內(nèi)的airflow壓力,定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜,預(yù)濾網(wǎng)(300小時(shí)/預(yù)濾網(wǎng),3000小時(shí)/HEPA)。
6. 水槽內(nèi)可添加消毒劑(Zephrin 1:750),需定期更換水槽中的水。
pET-24a(+)(pET24a)(60908-2789)y 原鈣粘蛋白γA8抗體
pET-24b(+)(pET24b)(60908-2788) 原鈣粘蛋白γA9抗體
pET-24c(+)(pET24c)(60908-2827) 原鈣粘蛋白γA11抗體
pET-24d(+)(pET24d) 原鈣粘蛋白γA12抗體
pET-25b(+)(pET25b)(60908-2790) 原鈣粘蛋白β12抗體
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胃癌細(xì)胞;MKN-45-Cas9-526培養(yǎng)pET-26b(+)(pET26b)(60908-2791) 原鈣粘蛋白β3抗體
pET-27b(+)(pET27b)(60908-2792) 原鈣粘蛋白γB1抗體
pET-28a(+)(pET28a) 原鈣粘蛋白γB2抗體
pET-28b(+)(pET28b)(60908-2819)y 原鈣粘蛋白γB4抗體
pET-28c(+)(pET28c) 原鈣粘蛋白γB6抗體
pET-29a(+)(pET29a)(60908-2794)y 原鈣粘蛋白γC3抗體
pET-29b(+)(pET29b) 原鈣粘蛋白γC4抗體
pET-29c(+)(pET29c) 磷酸蛋白聚糖PTPRZ抗體
pET-2a(pET2a) 神經(jīng)特異蛋白酪氨酸磷酸酶N5抗體
pET-30a(+)(pET30a)(60908-2797)y 足細(xì)胞表達(dá)蛋白/轉(zhuǎn)錄因子21抗體
pET-30b(+)(pET30b) 孕激素受體抗體
pET-30c(+)(pET30c)(60908-2832) 神經(jīng)細(xì)胞突觸蛋白PCLO抗體
pET-30Ek/LIC(pET30Ek/LIC)(60908-2795) 早老素γ分泌酶2抗體
pET-30Xa/LIC(pET30Xa/LIC)(60908-2796) 泛酸激酶1抗體
phospho-Fos B 蠶微粒子病PCR檢測試劑盒
phospho-FOXL2 倉鼠核因子kB受體活化因子配基(RANKL)ELISA Kit
Phospho-FoxO1 倉鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA Kit
Phospho-FoxO1 倉鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA Kit
Phospho-FoxO1 倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA Kit
Phospho-FOXO1 + FOXO3 + FOXO4 產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌PCR檢測試劑盒
phospho-FOXO1A 產(chǎn)毒副溶血弧菌PCR試劑盒
Phospho-FoxO3a 產(chǎn)氣莢膜梭菌C類磷脂酶基因(283bp)常規(guī)PCR檢測試劑盒
Phospho-FoxO3a 產(chǎn)氣莢膜梭菌PCR檢測試劑盒
Phospho-FoxO3a 腸產(chǎn)毒性E.coli核酸檢測試劑盒
phospho-FOXO4 腸道病毒EV70 PCR檢測試劑盒
phospho-FOXO4 腸道病毒EV71 PCR檢測試劑盒
phospho-FOXO4 腸道病毒EV71/柯薩奇病毒A16型2聯(lián)PCR檢測試劑盒
Phospho-FoxO4 腸道病毒PCR檢測試劑盒
Phospho-FRA1 腸道病毒通用型/EV71/柯薩奇病毒A16型3聯(lián)PCR檢測試劑盒
Phospho-FRAP1 腸道腺病毒40型PCR檢測試劑盒
phospho-FRS2 腸道腺病毒41型PCR檢測試劑盒
phospho-FSCN1 腸侵襲性E.coli核酸檢測試劑盒
phospho-FXYD1 腸致病性E.coli核酸檢測試劑盒
phospho-FXYD1 常見微生物培養(yǎng)基
phospho-G3BP1 常用PCR引物1 染色劑
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胃癌細(xì)胞;MKN-45-Cas9-526培養(yǎng)售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真或致銷售人員,我們將盡快為您解決。