優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
3磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)紫外分光光度法 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | BJ-01611165-2 |
商品介紹:
測定意義 GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途徑的關(guān)鍵酶,與糖異生途徑、體內(nèi)血糖濃度的維持和糖尿病的發(fā)生密切相關(guān),在機(jī)體糖、脂、蛋白代謝紊亂疾病中發(fā)揮重要作用。 測定原理 3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、無機(jī)磷和NAD,340nm處測定NADH的減少量可反映GADPH活性的高低。 需自備的儀器和用品 分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
黏膜選址su(抗原)巴氏醋桿菌核孔蛋白98kda(NUP98)elisa定量檢測試劑盒
髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b(抗原)大腸埃希菌成纖維生長因子結(jié)合蛋白1(FGFBP1)elisa定量檢測試劑盒
髓鞘相關(guān)糖蛋白(抗原)異常威克漢姆酵母血清樣蛋白P(SAP)elisa定量檢測試劑盒
基質(zhì)金屬蛋白mei-1(小鼠抗原)金針菇Rac-GTP酶激活蛋白1(Rac-GAP1)elisa定量檢測試劑盒
中腦核仁蛋白1(抗原)大豆慢生根瘤菌大鼠髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)elisa定量檢測試劑盒
中腦核仁蛋白2(抗原)Bacillus aryabhattai 大鼠過氧化氫酶(CAT)ELISA kit
一種應(yīng)激分子抗原細(xì)麗擬盤多毛孢醛固酮(ALD)elisa定量檢測試劑盒
多藥耐藥相關(guān)蛋白3(抗原)蘋果鏈格孢菌肌肽(Car)elisa定量檢測試劑盒
多藥耐藥相關(guān)蛋白1(抗原)谷an酸棒桿菌促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)elisa定量檢測試劑盒
肺耐藥相關(guān)蛋白(抗原)蠟葉散囊菌乳脂球表皮生長因子8 (MFG-E8)elisa定量檢測試劑盒
間皮su(多肽抗原)木糖氧化無色桿菌大鼠血管生成su樣蛋白3(ANGPTL3)elisa定量檢測試劑盒
MSH2抗原紅色鏈孢囊菌大鼠白介su2(IL-2)elisa定量檢測試劑盒
神經(jīng)激肽B受體(抗原)小柄凸臍蠕孢肌酸酐(Cr)elisa定量檢測試劑盒
低分子量神經(jīng)絲蛋白(抗原)氯酚節(jié)桿菌β萘酚(β-Nph)elisa定量檢測試劑盒
中分子量神經(jīng)絲蛋白(抗原)總狀毛霉角質(zhì)轉(zhuǎn)谷氨酰酶(TGM1)elisa定量檢測試劑盒
3磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)紫外分光光度法前動力蛋白2(PK2)試劑盒Anti-MSLN Antibody(PB0312)磷酸化鋅指蛋白36
蕈型受體M2(CHRM2)試劑盒Anti-MST1 Antibody鋅指蛋白347
胰島su(INS)試劑盒Anti-MT-CO1 Antibody鋅指蛋白BED5
半胱天冬酶1(P1)試劑盒Anti-MT-CO1 Antibody鋅指蛋白704
成纖維生長因子9(FGF9)試劑盒 Anti-MT-ND4 Antibody抑癌蛋白5/鋅指蛋白434
前列腺suF2α(PGF2α)試劑盒 Anti-MT-CO1 AntibodyZCWCC1
縮酶(ALD)試劑盒 Anti-MT-ND4 Antibody鋅指蛋白300