儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
規(guī)格參數(shù):
資源名稱 猴頭菇保存
種屬: Hericium│erinaceus
提供形式: 斜面培養(yǎng)物
安全等級: 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 菌種分類,生產(chǎn)食用菌
培養(yǎng)基: 17
生長條件: 20℃
存儲條件: 定期移植法
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培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
產(chǎn)品僅用于科研生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達(dá)3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對穩(wěn)定的細(xì)菌群體,產(chǎn)品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時,菌種是指細(xì)菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個菌株。
小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基萊西氏菌屬拉丁屬名: Laceyella sp.
小鼠嗅鞘細(xì)胞*培養(yǎng)基褪色沙雷氏菌(粘質(zhì)沙雷氏菌)拉丁屬名: Serratia marcescens
小鼠尿道上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基水叢毛單胞菌拉丁屬名: Comamonas aquatica
小鼠嗅鞘細(xì)胞生長因子土生隱球酵母拉丁屬名: Cryptococcus humicolus
小鼠卵巢成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基秀珍菇注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
小鼠輸尿管上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基紫棕炭團(tuán)菌拉丁屬名: Hypoxylon fuscum
小鼠子宮頸上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基嗜熱鏈球菌拉丁屬名: Streptococcus thermophilus
小鼠卵巢顆粒細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基土生克雷伯氏菌拉丁屬名: Klebsiella terrigena
小鼠子宮成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基馬昆德擬青霉拉丁屬名: Paecilomyces marquandii
小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基流產(chǎn)布魯氏菌拉丁屬名: abortus
小鼠子宮平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
小鼠卵巢上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基彎曲芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus flexus
小鼠淋巴成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基解淀粉周培瑾氏菌拉丁屬名: Zhouia amylolytica
OptiTDS™小鼠嗅鞘細(xì)胞組織解離液可可球二孢拉丁屬名: Lasiodiplodia theobromae
小鼠腎管狀上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基灰黃淺黃酵母拉丁屬名: Chrysozyma griseoflava
小鼠上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
CHO培養(yǎng)基基礎(chǔ)*250CHO Medium Base
SCHAEDLER 瓊脂*250SCHAEDLER AGAR
WILKINS-CHALGREN瓊脂*250WILKINS-CHALGREN AGAR
MCP瓊脂*250MCP Agar
厭氧菌瓊脂*250Anaerobic Agar
CDC厭氧菌瓊脂*250CDC Anaerobic Agar
葡萄糖肉浸液肉湯 *250Dextrose Meat Infusion Broth
猴頭菇保存RAPIDTRANSFERBUFFER,10X快速轉(zhuǎn)移緩沖液生物技術(shù)級透明至淡黃色液體RTsigma
7758-5-6酸鉀, ACSpotewwium iodate
ALCIANBLUE阿利新藍(lán) 8 GX高純級深藍(lán)紫色粉末RTsigma
磷酸二氫鈉 Sodium phosphate monobasic dihydrate,... 13472-35-0 100G 通用試劑
2,2-二甲基丁烷 2,2-Dimethylbutane,≥99% 75-83-2 25ML 通用試劑
明膠培養(yǎng)基10克RT
7782-86-7亞MERCUROUS nitnATE
銥粉5克
對苯醌 p-Benzoquinone,≥98% 106-51-4 50G 通用試劑
8-氮鳥嘌呤 8-Azaguanine 134-58-7 1VL 通用試劑