優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)測試盒可見分光光度法 | 可見分光光度法 | 50管/24樣 | BJ-01611115-2 |
商品介紹:
測定意義: 半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)廣泛存在于百合科蔥屬(如大蒜和洋蔥),十字花科蕓薹屬 (如卷心菜,菜花,西蘭花),以及豆科中的合金歡屬中,并通常被稱為蒜氨酸酶(Alliinase)。香菇酸在γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶和半胱an酸亞砜裂解酶的作用下轉(zhuǎn)化成香菇精,以及產(chǎn)生丙酮酸、乙醛、甲醛和NH3。CSL是內(nèi)源性甲醛生成的關(guān)鍵酶之一,測定CSL活性對于研究食品安全具有重要意義。 測定原理: CSL催化S-甲基-L-半胱an酸亞砜反應(yīng)產(chǎn)生丙酮酸,與2,4-二硝ji苯肼反應(yīng),在堿性條件下顯棕紅色,在510nm下有特征吸收峰。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器: 天平、研缽、離心機(jī)、分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、蒸餾水。 |
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
c-erbB-2蛋白(抗原)日本曲霉牡丹皮Cortex Moutan
造血干特異性蛋白乳桿菌屬廣天仙子Wide sky?Fairy
蕈型乙酰受體(抗原)檸條根瘤菌陳皮炭Chen Pitan
C-肽(C肽)紅色鏈霉菌人工虎骨Artificial?bones
鈣結(jié)合蛋白(抗原)蘋果黑腐皮殼白薇Bai Wei
腺苷受體A3抗原梅奇酵母屬全葉青蘭All Ye Qinglan
巨噬來源的趨化因子αV多肽豬細(xì)小病土鱉蟲(冀地鱉)Woodlouse?(Hebei?Eupolyphaga sinensis)
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗原釀酒酵母紫草(新疆紫草)Gromwell?(Lithospermum?Xinjiang)
環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(抗原)枯草芽孢桿菌黃根Huang Gen
磷酸化環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(多肽)膠凍樣類芽孢桿菌猴棗Hou Zao
腎上腺su能受體2抗原粉狀畢赤酵母龜甲The tortoise shell
促腎上腺皮質(zhì)激su釋放因子需鈉弧菌燈心草Rush
降鈣su(抗原)異常漢遜酵母苦杏仁Bitter almond
降鈣su受體(抗原)枯草芽孢桿菌預(yù)知子Fructus Akebiae
鐵蛋白抗原蠟狀芽孢桿菌梧桐子Wu Tongzi
半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)測試盒可見分光光度法BTG3關(guān)聯(lián)核蛋白(BANP)試劑盒Anti-IRAK4 Antibody腫瘤壞死因子配體超家族成員15
骺蛋白聚糖(EPYC)試劑盒 Anti-IRF1 Antibody轉(zhuǎn)移生長因子β5
抑瘤suM受體(OSMR)試劑盒Anti-IRF2 Antibody磷酸化微管相關(guān)蛋白
胱天蛋白mei4(P4)試劑盒 Anti-IRF3 Antibody磷酸化微管相關(guān)蛋白
DNA結(jié)合蛋白(DBP)試劑盒 Anti-IRF2 Antibody磷酸化微管相關(guān)蛋白
轉(zhuǎn)錄激活因子-5(ATF-5)試劑盒 Anti-IRF3 Antibody磷酸化微管相關(guān)蛋白
肝配蛋白A受體1 (EPHA1)試劑盒Anti-IRF3 Antibody磷酸化微管相關(guān)蛋白