優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
土壤漆酶測試盒微量法 | 微量法 | 100管/48樣 | BJ-01611311-1 |
商品介紹:
測定意義 漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍(lán)氧化酶家族,廣泛分布于真菌和高等植物中,具有較強(qiáng)的氧化還原能力,在紙漿生物漂白,環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應(yīng)用。 測定原理 漆酶分解底物ABTS產(chǎn)生ABTS自由基,在420nm處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS,測定ABTS自由基的增加速率,可計(jì)算得漆酶活性。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、震蕩儀。 |
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體自養(yǎng)假諾卡氏菌豬活化suA(ACV-A)Elisa測定試劑盒
γ-銜接蛋白相關(guān)蛋白1抗體冷海水黃桿菌豬乙酰受體抗體(AChRab)Elisa測定試劑盒
γ-銜接蛋白相關(guān)蛋白2抗體野油菜黃單胞菌棲絨毛致病變種兔一氧化氮合成酶(NOS)Elisa測定試劑盒
γ-銜接蛋白相關(guān)蛋白3抗體紅酵母表面趨化因子受體3抗體流式免疫組化
配子生成su抗體釀酒酵母防御suβ2抗體流式免疫組化
γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶2重鏈抗體半膠蘑菇(暫定名)腦型脂肪suan結(jié)合蛋白抗體流式免疫組化
γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶5重鏈抗體拜耳接合酵母孤菲肽/痛敏肽抗體流式免疫組化
磷suan化GATA結(jié)合蛋白3抗體Promicromonospora鉀依賴鈉鈣交換蛋白6
磷suan化GATA結(jié)合蛋白3抗體擬香味類香味菌滑膜凋亡抑制物1抗體流式免疫組化
延伸因子G2抗體沙氏芽孢桿菌端粒體復(fù)制結(jié)合因子1抗體流式免疫組化
葡糖酶抗體姬松茸*蛋白meiK
谷氨酰6-磷suan果糖轉(zhuǎn)移酶抗體釀酒酵母寡霉su
谷胱S轉(zhuǎn)移酶θ抗體熱帶假絲酵母葡聚糖凝膠G-15
谷胱S轉(zhuǎn)移酶θ2抗體樟疫霉對苯二
γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶6抗體檸檬色葡萄球菌丙二酰
土壤漆酶測試盒微量法周期su依賴性激酶6(CDK6)試劑盒 Anti-XRCC5 Antibody(PB0411)膠體金標(biāo)記的抗長爪沙鼠IgG
球蛋白A1 (IgA1)試劑盒Anti-XRCC5 AntibodyCy3標(biāo)記的抗長爪沙鼠IgG
血管抑su/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)試劑盒 Anti-YBX1 AntibodyCy5標(biāo)記的抗長爪沙鼠IgG
XII B組磷脂酶A2(PLA2G12B)試劑盒Anti-YTHDF2 AntibodyPE標(biāo)記的抗長爪沙鼠IgG
二氫嘧啶脫氫酶(DPYD)試劑盒 Anti-XRCC6 Antibody(PB0524)APC標(biāo)記的抗長爪沙鼠IgG
胚外胚層發(fā)育蛋白(EED)試劑盒Anti-YBX1 AntibodyAlexa Fluor 350標(biāo)記的抗長爪沙鼠IgG
腎su(REN)試劑盒Anti-XRCC6 AntibodyAlexa Fluor 488標(biāo)記的抗長爪沙鼠IgG