基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,產(chǎn)品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來長(zhǎng)期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。
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規(guī)格參數(shù):
資源名稱 日本根霉規(guī)格
種屬: Rhizopus│japonicus
提供形式: 凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: 0017
生長(zhǎng)條件: 25-28℃
存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長(zhǎng)條件 30℃,好氧
存儲(chǔ)條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,產(chǎn)品僅用于科研從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
Canine Influenza Virus(CIV)犬流感病毒通用LAMP試劑盒英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:500T
發(fā)貨周期:1~3天
PKH67/PI 雙染細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒是利用細(xì)胞熒光染料PKH67和PI對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色,利用PKH67標(biāo)記靶細(xì)胞,PI標(biāo)記死的靶細(xì)胞來區(qū)分不同的細(xì)胞,活的靶細(xì)胞成綠色,死的靶細(xì)胞成紅色和綠色,從而檢測(cè)細(xì)胞毒性作用。
根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì),可以用來檢測(cè)化合物的細(xì)胞毒性作用。也可以用來檢測(cè)殺傷性T 細(xì)胞或NK 細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用。
熒光染料PKH67是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的新型染料,可以標(biāo)記活體細(xì)胞,通過與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標(biāo)記細(xì)胞。對(duì)細(xì)胞毒性較小,熒光背景低,脂溶性高,能夠輕易穿透細(xì)胞膜,有著強(qiáng)而穩(wěn)定的綠色熒光。經(jīng)PKH67標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究,且具有不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色的功能。
在細(xì)胞分裂增殖過程中,PKH67的熒光強(qiáng)度會(huì)隨著細(xì)胞的分裂而逐級(jí)遞減,標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中,因此其熒光強(qiáng)度是親代細(xì)胞的一半,根據(jù)這一特性,它可被用于檢測(cè)細(xì)胞增殖,細(xì)胞周期的估算及細(xì)胞分裂等方面。PKH67標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一,并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均一。在細(xì)胞分裂增殖過程中,PKH67標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中,熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半,通過流式細(xì)胞儀根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同,可檢測(cè)出未分裂細(xì)胞,分裂一次(1/2的熒光強(qiáng)度),二次(1/4的熒光強(qiáng)度),三次(1/8的熒光強(qiáng)度),以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。PKH67可檢測(cè)分裂次數(shù)多達(dá)六次甚至更多。
除了用于細(xì)胞增殖檢測(cè),PKH67 還可以用于細(xì)胞的體外盒體內(nèi)示蹤,標(biāo)記后熒光在胞內(nèi)表達(dá)穩(wěn)定,陽性標(biāo)記率達(dá)98%以上,標(biāo)記細(xì)胞形態(tài)良好,能有效地觀察細(xì)胞在體外的誘導(dǎo)分化情況;或?qū)?biāo)記的細(xì)胞注入體內(nèi),可以有效的顯示移植細(xì)胞在活體組織中的遷移及分化。
PKH67標(biāo)記的細(xì)胞用于體內(nèi)觀察可以長(zhǎng)達(dá)數(shù)周之久,它常被用來做活體細(xì)胞檢測(cè)實(shí)驗(yàn)和用熒光電鏡觀察細(xì)胞長(zhǎng)期活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)。PKH67 毒性較小,不影響細(xì)胞的增殖能力。此方法操作簡(jiǎn)單,且不用放射性同位素,不存在安全隱患。可以更快速,更準(zhǔn)確和更安全地得到想要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
PKH67/PI標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞毒性檢測(cè)。
PKH67標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光,熒光波長(zhǎng):λex=490 nm,λem=502 nm。流式檢測(cè)時(shí)的激發(fā)波長(zhǎng)可以選擇488nm,此時(shí)的發(fā)射波長(zhǎng)為502nm,使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)可以采用FL1 detection channel。PI標(biāo)記細(xì)胞呈紅色熒光,流式檢測(cè)時(shí)的激發(fā)波長(zhǎng)可以選擇488nm,此時(shí)的發(fā)射波長(zhǎng)為647nm,使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)可以采用FL2 detection channel。
PKH67標(biāo)記的細(xì)胞除了流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞毒性外,還可單染后用于細(xì)胞增殖檢測(cè),或者用熒光酶標(biāo)板定量活細(xì)胞數(shù)目,或者用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察。
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存。
連翹脂苷BLeukemia inhibitory factor,LIF ELISA kit純度:≥98%
靈芝Aleucocyte antigen-B27 ELISA Kit純度:≥94%
靈芝BALCAM ELISA Kit純度:≥94%
蘆薈苷ALTC4 ELISA Kit純度:≥98%
魯斯可皂苷元LTB4 ELISA Kit純度:鑒別用(80%)
羅漢果皂甙IVInterleukin-9,IL-9 ELISA KIT純度:≥98%
塞琳IL-8 ELISA Kit純度:≥95%
Rat anti-Mocyte antibody,AMA ELISA Kit大鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T121309-TLC法鑒別馬蘭草規(guī)格:2.0g
Rat oxidized lowdensity lipoprotein antibody,OLAb ELISA Kit大鼠氧化低密度蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T121310-TLC法鑒別紫檀香規(guī)格:0.5g
Rat Anti-Smooth Muscle Antibody,ASMA ELISA Kit大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒進(jìn)口/分裝規(guī)格:96T/48T121311-200402TLC法鑒別絞股藍(lán)規(guī)格:2.0g
Rat nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISA Kit大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒進(jìn)口/原裝規(guī)格:96T/48T121312-200301TLC法鑒別鳳尾草規(guī)格:1.0g
Rat Thrombin activatable fibrilysis inhibitor,TAFI ELISA Kit大鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T121313-200503TLC法鑒別鐵筷子規(guī)格:2.0g
Rat plaet membrane glycoprotein ⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢa ELISA Kit大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T121314-200402TLC法鑒別吉祥草規(guī)格:2.0g
日本根霉規(guī)格豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/SLAⅠ)ELISA試劑盒 英文名稱:swine major histocompatibility complexⅠ,MHCⅠ/SLAⅠ ELISA Kit進(jìn)口/分裝
豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/SLAⅡ)ELISA試劑盒英文名稱:swine major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ/SLAⅡ ELISA Kit進(jìn)口/原裝
豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA試劑盒英文名稱:swine major histocompatibility complexⅢ,MHCⅢ/SLAⅢ ELISA Kit進(jìn)口/原裝
豬轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine transforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit進(jìn)口/分裝
豬轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒 英文名稱:Porcine Transforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISA Kit進(jìn)口/分裝
豬組胺(HIS)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Histamine,HIS ELISA Kit*
豬組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Tissue-type Plasimigen Actilyse,t-PA ELISA Kit進(jìn)口/分裝